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HEH 人胚胎心臟組織來源細胞
培養條件:
*培養基: RPMI 1640+10%胎(tai)牛血清
培養條(tiao)件:37.0C carbon dioxide(CO2),5%
HEH 人胚胎心臟組織來源細胞
傳代方法:
收到細胞后(hou),取出培養瓶(ping)在倒(dao)置(zhi)顯微鏡下觀察細胞生(sheng)長情(qing)況。
(一(yi))如果細胞(bao)未長滿,用75%酒(jiu)精噴灑(sa)整個(ge)瓶消毒后(hou)放到超菌臺內,
嚴格無菌(jun)操作,打開細胞培(pei)(pei)養(yang)瓶(ping),吸出培(pei)(pei)養(yang)液,僅留(liu)下(xia)10ml培(pei)(pei)養(yang)液在瓶(ping)內繼續(xu)培(pei)(pei)養(yang)。
(二)如果細胞已長滿,即可進行傳代培養。具(ju)體步驟如下:
1. 棄去培養液,用PBS(不含鈣,鎂(mei)離子)洗(xi)1-2次。
2. 加1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于(yu)培(pei)養瓶中,倒轉放于(yu)37度培(pei)養箱1-3分(fen)(fen)鐘(zhong)預熱,然后又(you)將(jiang)培(pei)養瓶倒轉大(da)約(yue)30秒后,在倒置顯微鏡(jing)下(xia)觀(guan)察(cha)細(xi)胞消化情況,若(ruo)細(xi)胞大(da)部分(fen)(fen)變圓分(fen)(fen)散,輕敲(qiao)幾下(xia)培(pei)養培(pei)養瓶,細(xi)胞隨即脫落下(xia)來。
3. 加入6-8ml*培養基(ji),吸出(chu),分到新的培養瓶(ping)中。一傳二。
注意:傳代后一(yi)半(ban)用(yong)我們的培(pei)養基,一(yi)半(ban)用(yong)你們的,以免細(xi)胞不適應而造
成生長不好。
HEH
HEH
凍(dong)存方法: 凍(dong)存液:95%*培養(yang)液,5%DMSO
儲存:液氮儲存
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