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HELF 人胚肺成纖維細胞
培養條件：
*培養基： RPMI 1640+10%胎(tai)牛血(xue)清
培養條件：37.0C carbon dioxide（CO2）,5%
HELF 人胚肺成纖維細胞
HELF
傳代方法：
收到細胞后，取出(chu)培(pei)養瓶(ping)在(zai)倒置顯(xian)微鏡下觀(guan)察細胞生長情況。
（一）如果細胞未(wei)長滿(man)，用(yong)75%酒精噴灑整(zheng)個瓶消毒后(hou)放到超菌(jun)臺內，嚴格無菌(jun)操作，打(da)開細胞培(pei)(pei)養瓶，吸出培(pei)(pei)養液，僅留(liu)下10ml培(pei)(pei)養液在瓶內繼續培(pei)(pei)養。。。。。
（二）如果(guo)細胞已長滿，即可進行傳(chuan)代培養(yang)。具(ju)體步(bu)驟如下面：
1. 棄去培養液(ye)，用PBS（不含鈣(gai)，鎂離子）洗1-2次。
2. 加1ml消(xiao)化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yang)(yang)瓶(ping)中，倒(dao)轉(zhuan)放于37度培養(yang)(yang)箱1-3分鐘預熱，然后又將培養(yang)(yang)瓶(ping)倒(dao)轉(zhuan)大(da)約30秒后，在倒(dao)置(zhi)顯微鏡(jing)下觀(guan)察細(xi)胞(bao)消(xiao)化情況(kuang)，若細(xi)胞(bao)大(da)部分變圓(yuan)分散(san)，輕敲幾(ji)下培養(yang)(yang)培養(yang)(yang)瓶(ping)，細(xi)胞(bao)隨即脫落下來。
3. 加入6-8ml*培養(yang)基，吸出，分到新的培養(yang)瓶(ping)中。一(yi)傳二。
注(zhu)意：傳代后一半(ban)用我們(men)的培養基，一半(ban)用你們(men)的，以免(mian)細(xi)胞(bao)不適應而造
成生長不好。
HELF
凍(dong)存方法(fa)： 凍(dong)存液：95%*培養液，5%DMSO
儲存：液氮儲存
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