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KMB 人胚肺成纖維樣細胞
培(pei)養(yang)條件：*培(pei)養(yang)基： DMEM高糖(tang)90%+10%胎牛(niu)血清
培(pei)養條件：37.0C carbon dioxide（CO2）,5%
KMB 人胚肺成纖維樣細胞
傳代方法：
收到細胞(bao)后，取出培養瓶(ping)在倒置顯微鏡下觀察細胞(bao)生(sheng)長情況。
（一）如果細胞(bao)未長滿，用75%酒精噴灑整個瓶(ping)消(xiao)毒后放到超菌臺內(nei)，嚴格無菌操作，打(da)開細胞(bao)培(pei)(pei)(pei)養瓶(ping)，吸出培(pei)(pei)(pei)養液(ye)，僅(jin)留下10ml培(pei)(pei)(pei)養液(ye)在瓶(ping)內(nei)繼續培(pei)(pei)(pei)養。
（二）如果(guo)細(xi)胞已長滿(man)，即(ji)可進行(xing)傳(chuan)代培養。具體步驟如下：
1. 棄去培養液，用(yong)PBS（不含鈣，鎂(mei)離子）洗1-2次。
2. 加(jia)1ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培(pei)養(yang)(yang)瓶中(zhong)，倒(dao)轉放于37度培(pei)養(yang)(yang)箱1-3分鐘(zhong)預熱，然后又將培(pei)養(yang)(yang)瓶倒(dao)轉大約30秒后，在倒(dao)置顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓分散(san)，輕敲幾下培(pei)養(yang)(yang)培(pei)養(yang)(yang)瓶，細胞隨(sui)即脫落下來。
3. 加(jia)入6-8ml*培養(yang)基，吸出，分到新的培養(yang)瓶中。一傳二。
注意：傳代后一半(ban)用我們的(de)培養基，一半(ban)用你們的(de)，以免細胞不適應而造
成生長不好。
KMB
凍存方法： 凍存液：95%*培(pei)養液，5%DMSO
儲存：液氮儲存
KMB KMB
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