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KYSE 450 人食管鱗癌細胞
培(pei)養(yang)(yang)條件：*培(pei)養(yang)(yang)基： DMEM高糖90%+10%胎牛血清
培養條件：37.0C carbon dioxide（CO2）,5%
KYSE 450 人食管鱗癌細胞
KYSE 450
傳代方法：
收到細(xi)(xi)胞(bao)后(hou)，取出(chu)培養，瓶在倒置顯微鏡下觀察細(xi)(xi)胞(bao)生長情況。
（一）如果細胞未長滿(man)用75%酒精噴灑(sa)整個瓶(ping)(ping)消(xiao)毒后(hou)放到超(chao)菌臺內(nei)，嚴格無(wu)菌操作，打開(kai)細胞培養(yang)瓶(ping)(ping)，吸出培養(yang)液，僅留下10ml培養(yang)液在瓶(ping)(ping)內(nei)繼續培養(yang)。
（二(er)）如(ru)果細胞(bao)已長滿，即(ji)可(ke)進行傳(chuan)代培養(yang)。具體步驟如(ru)下：
1. 棄去培養液，用PBS（不含(han)鈣，鎂離(li)子）洗1-2次。
2. 加1ml消(xiao)化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培(pei)(pei)養(yang)(yang)瓶中，倒(dao)轉(zhuan)放于37度(du)培(pei)(pei)養(yang)(yang)箱(xiang)1-3分鐘預熱，然后(hou)又將培(pei)(pei)養(yang)(yang)瓶倒(dao)轉(zhuan)大約(yue)30秒(miao)后(hou)，在倒(dao)置顯微鏡(jing)下觀(guan)察細(xi)胞(bao)消(xiao)化情況，若細(xi)胞(bao)大部分變圓(yuan)分散，輕敲幾下培(pei)(pei)養(yang)(yang)培(pei)(pei)養(yang)(yang)瓶，細(xi)胞(bao)隨即脫落下來。
3. 加入6-8ml*培養基，吸出，分到新的培養瓶中。一傳二。
注(zhu)意：傳代后(hou)一(yi)半用(yong)我們(men)的培養(yang)基(ji)，一(yi)半用(yong)你(ni)們(men)的，以(yi)免細胞不適應而造
成生長不好。
KYSE 450
凍存(cun)(cun)方(fang)法： 凍存(cun)(cun)液(ye)：95%*培養(yang)液(ye)，5%DMSO
儲存：液氮儲存
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