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GES-1 人胃粘膜細胞
培養條件:
*培養基: RPMI 1640+10%胎牛血清
培養(yang)條件:37.0C carbon dioxide(CO2),5%
GES-1 人膜細胞
傳代方法:
收到細胞后,取出培(pei)養瓶在倒置顯微鏡下觀察細胞生(sheng)長(chang)情況。
(一)如果細胞未長滿,用75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到胃粘膜細胞
GES-1 人胃粘膜細胞
GES-1 人胃粘超菌臺(tai)內,嚴格(ge)無菌操作,打開細(xi)胞(bao)培(pei)(pei)養(yang)瓶,吸出培(pei)(pei)養(yang)液(ye),僅留下10ml培(pei)(pei)養(yang)液(ye)在瓶內繼續(xu)培(pei)(pei)養(yang)。
(二)如(ru)果細胞已長滿,即(ji)可進行傳代培養。具體步驟(zou)如(ru)下:
1. 棄(qi)去培(pei)養液(ye),用(yong)PBS(不含(han)鈣(gai),鎂離子)洗1-2次。
2. 加1ml消(xiao)化(hua)液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于(yu)培(pei)(pei)養瓶(ping)中(zhong),倒轉(zhuan)放于(yu)37度培(pei)(pei)養箱(xiang)1-3分鐘預熱,然后又將(jiang)培(pei)(pei)養瓶(ping)倒轉(zhuan)大(da)約30秒后,在倒置顯微(wei)鏡下(xia)觀(guan)察細(xi)(xi)胞(bao)消(xiao)化(hua)情(qing)況,若(ruo)細(xi)(xi)胞(bao)大(da)部分變圓分散,輕敲(qiao)幾下(xia)培(pei)(pei)養培(pei)(pei)養瓶(ping),細(xi)(xi)胞(bao)隨即脫(tuo)落(luo)下(xia)來。
3. 加入6-8ml*培(pei)養基,吸出,分到(dao)新的培(pei)養瓶中。一傳二(er)。
注意:傳代后一(yi)半(ban)用我們的培(pei)養(yang)基,一(yi)半(ban)用你們的,以免(mian)細胞不(bu)適應而造
成生長不好。
GES-1
凍存方(fang)法: 凍存液:95%*培養液,5%DMSO
儲存:液氮儲存
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