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SF126 人腦瘤細胞
培養條件:
*培(pei)養基(ji):DMEM高糖培(pei)養基(ji)90%;胎牛血(xue)清10%。
培(pei)養條件:37.0C carbon dioxide(CO2),5%
SF126 人腦瘤細胞
傳代方法:
收到細胞后,取出培養瓶在倒置顯(xian)微鏡下觀察細胞生長情(qing)況。
(一)如果(guo)細胞未長滿,用75%酒精噴灑(sa)整(zheng)個瓶消(xiao)毒后(hou)放(fang)到超菌臺內,
嚴格(ge)無菌操作,打(da)開(kai)細(xi)胞培(pei)養瓶,吸出培(pei)養液,僅留下(xia)10ml培(pei)養液在(zai)瓶內繼續培(pei)養。
(二)如果細胞已(yi)長滿,即可進行傳代培養。具體步驟如下:
1. 棄去培養液,用PBS(不含(han)鈣(gai),鎂離子)洗1-2次(ci)。
2. 加1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶(ping)中,
倒轉(zhuan)放于(yu)37度(du)培養箱1-3分鐘預熱,然后(hou)又將培養瓶(ping)倒轉(zhuan)大約30秒后(hou),
在倒置顯微鏡下(xia)(xia)觀察(cha)細胞(bao)消化情況,若細胞(bao)大(da)部分變圓(yuan)分散(san),輕敲幾下(xia)(xia)培養培養瓶(ping),細胞(bao)隨即脫(tuo)落下(xia)(xia)來。
3. 加入(ru)6-8ml*培(pei)養基,吸(xi)出,分到新的(de)培(pei)養瓶中(zhong)。1:3~1:6傳代(dai);2~3天(tian)1次。
。
注(zhu)意:傳代(dai)后一(yi)半用(yong)我們的培養(yang)基(ji),一(yi)半用(yong)你們的,以(yi)免細胞不適應而造
成生長不好。
SF126
凍存方法(fa): 凍存液:基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
儲存:液氮儲存
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