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NB4 人白血病早幼粒細胞
培養條件：
*培養基： DMEM，90%；胎牛血清10%。
培養條件：37.0C carbon dioxide（CO2）,5%
NB4 人白血病早幼粒細胞
傳代方法：
收到(dao)細胞后(hou)，取(qu)出(chu)培養瓶在(zai)倒置顯微鏡下觀(guan)察細胞生長情(qing)況。
（一(yi)）如果(guo)細(xi)胞未長(chang)滿，用75%酒(jiu)精(jing)噴(pen)灑整個瓶(ping)(ping)消(xiao)毒后(hou)放到超菌(jun)臺內，嚴格(ge)無菌(jun)操作，打(da)開細(xi)胞培(pei)養瓶(ping)(ping)，吸出培(pei)養液，僅留下10ml培(pei)養液在瓶(ping)(ping)內繼(ji)續培(pei)養。
（二(er)）如果細胞已長滿，即可進(jin)行傳代(dai)培養。具體步驟如下：
1. 棄(qi)去培養液，用(yong)PBS（不(bu)含鈣，鎂(mei)離子(zi)）洗1-2次。
2. 加1ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培(pei)養(yang)(yang)瓶(ping)中(zhong)，倒(dao)轉放于37度培(pei)養(yang)(yang)箱1-3分(fen)鐘預熱，然后又將培(pei)養(yang)(yang)瓶(ping)倒(dao)轉大(da)約30秒后，在倒(dao)置(zhi)顯微鏡下觀(guan)察細(xi)胞(bao)消化情(qing)況，若細(xi)胞(bao)大(da)部分(fen)變圓分(fen)散，輕(qing)敲幾下培(pei)養(yang)(yang)培(pei)養(yang)(yang)瓶(ping)，細(xi)胞(bao)隨即脫落下來。
3. 加入6-8ml*培養(yang)基，吸(xi)出，分(fen)到新的培養(yang)瓶中。一傳二(er)。
注意：傳代后(hou)一半用(yong)我(wo)們(men)的(de)培養基，一半用(yong)你們(men)的(de)，以(yi)免細胞(bao)不適應而造(zao)
成生長不好。
凍存方法：
凍(dong)存液(ye)：95%*培養液(ye)，5%DMSO
儲存：液氮儲存
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NB4 人白血病早幼粒細胞
培養條件：
*培養(yang)基： DMEM，90%；胎牛血(xue)清10%。
培(pei)養條件：37.0C carbon dioxide（CO2）,5%
NB4 人白血病早幼粒細胞
傳代方法：
收(shou)到細(xi)(xi)胞(bao)后，取出培養瓶在倒置顯(xian)微鏡(jing)下觀察(cha)細(xi)(xi)胞(bao)生長(chang)情(qing)況。
（一）如果(guo)細胞未長滿，用75%酒精噴灑整個瓶(ping)消毒后放到超(chao)菌臺(tai)內(nei)，嚴格無菌操作(zuo)，打開細胞培(pei)(pei)養(yang)瓶(ping)，吸出(chu)培(pei)(pei)養(yang)液(ye)，僅留下10ml培(pei)(pei)養(yang)液(ye)在瓶(ping)內(nei)繼續培(pei)(pei)養(yang)。
（二）如果細胞已長滿，即(ji)可進行傳代培(pei)養。具體步驟如下：
1. 棄去(qu)培養液，用PBS（不含鈣，鎂離子）洗1-2次(ci)。
2. 加1ml消(xiao)化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于(yu)培(pei)養瓶中，倒轉放于(yu)37度培(pei)養箱(xiang)1-3分鐘(zhong)預(yu)熱，然后(hou)又將培(pei)養瓶倒轉大(da)約(yue)30秒后(hou)，在倒置(zhi)顯微鏡下觀察細(xi)胞(bao)消(xiao)化情況，若(ruo)細(xi)胞(bao)大(da)部分變圓分散，輕敲幾下培(pei)養培(pei)養瓶，細(xi)胞(bao)隨即脫落下來。
3. 加(jia)入6-8ml*培養(yang)基，吸出，分到(dao)新(xin)的培養(yang)瓶(ping)中。一傳二。
注意：傳代后一(yi)半用我們(men)(men)的培養基(ji)，一(yi)半用你(ni)們(men)(men)的，以(yi)免細(xi)胞不適(shi)應(ying)而造
成生長不好。
凍存方法：
凍存液：95%*培養液，5%DMSO
儲存：液氮儲存
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NB4 人白血病早幼粒細胞
培養條件：
*培養基： DMEM，90%；胎(tai)牛血清10%。
培養條件：37.0C carbon dioxide（CO2）,5%
NB4 人白血病早幼粒細胞
傳代方法：
收(shou)到細(xi)胞后，取(qu)出培養瓶在倒置顯(xian)微鏡下觀察細(xi)胞生長情(qing)況。
（一）如果細(xi)胞未長滿，用75%酒(jiu)精(jing)噴灑整個瓶(ping)(ping)(ping)消毒后放到超菌(jun)臺(tai)內，嚴(yan)格無菌(jun)操作，打開(kai)細(xi)胞培養(yang)瓶(ping)(ping)(ping)，吸出培養(yang)液，僅留下(xia)10ml培養(yang)液在瓶(ping)(ping)(ping)內繼續培養(yang)。
（二(er)）如(ru)果細胞已(yi)長滿，即可(ke)進行(xing)傳代培(pei)養(yang)。具體步(bu)驟(zou)如(ru)下：
1. 棄(qi)去培養(yang)液，用(yong)PBS（不含鈣，鎂離(li)子）洗1-2次。
2. 加1ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培(pei)養(yang)(yang)瓶(ping)中，倒(dao)轉(zhuan)放(fang)于37度培(pei)養(yang)(yang)箱1-3分(fen)鐘預(yu)熱，然后(hou)(hou)又(you)將培(pei)養(yang)(yang)瓶(ping)倒(dao)轉(zhuan)大約30秒(miao)后(hou)(hou)，在(zai)倒(dao)置顯微鏡下觀察細胞消化情(qing)況(kuang)，若(ruo)細胞大部分(fen)變圓分(fen)散，輕(qing)敲幾下培(pei)養(yang)(yang)培(pei)養(yang)(yang)瓶(ping)，細胞隨即脫(tuo)落(luo)下來。
3. 加入6-8ml*培養(yang)基(ji)，吸出，分到(dao)新的培養(yang)瓶中。一傳(chuan)二。
注意(yi)：傳代(dai)后一半用我們的培養基，一半用你們的，以免細胞不(bu)適應而造(zao)
成生長不好。
凍存方法：
凍存液(ye)：95%*培養液(ye)，5%DMSO
儲存：液氮儲存
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NB4 人白血病早幼粒細胞
培養條件：
*培養基： DMEM，90%；胎牛(niu)血清10%。
培養條件：37.0C carbon dioxide（CO2）,5%
NB4 人白血病早幼粒細胞
傳代方法：
收到細胞后，取出培養瓶在倒置(zhi)顯(xian)微鏡下觀(guan)察細胞生長情況。
（一(yi)）如果細(xi)胞未長滿，用75%酒精(jing)噴灑(sa)整個瓶消毒后放(fang)到超菌(jun)臺內，嚴格無菌(jun)操(cao)作，打(da)開細(xi)胞培養瓶，吸出培養液，僅留下10ml培養液在(zai)瓶內繼續(xu)培養。
（二）如果細胞已長滿，即可進行傳代培(pei)養。具(ju)體步驟如下：
1. 棄去培養液，用PBS（不含鈣，鎂離(li)子）洗1-2次。
2. 加(jia)1ml消(xiao)化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yang)(yang)(yang)瓶(ping)中，倒轉(zhuan)放于37度培養(yang)(yang)(yang)箱1-3分鐘預熱，然后又將培養(yang)(yang)(yang)瓶(ping)倒轉(zhuan)大約30秒后，在倒置顯微鏡下觀察細(xi)胞(bao)消(xiao)化情況，若細(xi)胞(bao)大部分變圓分散，輕敲幾下培養(yang)(yang)(yang)培養(yang)(yang)(yang)瓶(ping)，細(xi)胞(bao)隨即脫落下來。
3. 加入6-8ml*培養(yang)基，吸出，分到新的培養(yang)瓶中。一傳二。
注(zhu)意(yi)：傳代后一半用我們的培養基，一半用你們的，以免細胞不(bu)適應(ying)而(er)造
成生長不好。
凍存方法：
凍存液：95%*培養液，5%DMSO
儲存：液氮儲存
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