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293AV 人胚腎細胞-用于病毒包裝
培養條件:
*培養基: EMEM,90%; 胎牛血清或新生牛血清, 10%。
培養條件:37.0C carbon dioxide(CO2),5%
293AV 人胚腎細胞-用于病毒包裝
傳代方法:
收到細胞后,取出(chu)培養瓶在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情(qing)況(kuang)。
(一)如果細胞未長滿,用75%酒精噴灑整(zheng)個瓶(ping)消毒(du)后放到超菌(jun)臺內(nei),嚴格無菌(jun)操(cao)作,打開細胞培(pei)養(yang)(yang)瓶(ping),吸出培(pei)養(yang)(yang)液,僅留下10ml培(pei)養(yang)(yang)液在瓶(ping)內(nei)繼續(xu)培(pei)養(yang)(yang)。
(二)如(ru)(ru)果細(xi)胞已長滿,即(ji)可(ke)進(jin)行傳代培養。具體(ti)步驟如(ru)(ru)下(xia):
1. 棄去培養液,用PBS(不含鈣(gai),鎂離子(zi))洗(xi)1-2次。
2. 加1ml消化(hua)液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培(pei)養瓶(ping)(ping)中,倒(dao)轉放于37度培(pei)養箱1-3分鐘預熱(re),然后又(you)將培(pei)養瓶(ping)(ping)倒(dao)轉大約30秒后,在倒(dao)置顯(xian)微(wei)鏡下觀察細胞消化(hua)情況,若細胞大部分變圓分散,輕敲幾(ji)下培(pei)養培(pei)養瓶(ping)(ping),細胞隨(sui)即脫落下來。
3. 加入6-8ml*培(pei)養(yang)基,吸出,分到新的(de)培(pei)養(yang)瓶中。一傳二。
注意:傳代后(hou)一(yi)半用我們(men)(men)的培養(yang)基,一(yi)半用你們(men)(men)的,以免細(xi)胞不適應而造
成生長不好。
凍存方法:
凍存液:95%*培養液,5%DMSO
儲存:液氮儲存
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