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SP 6.5 人眼脈洛膜黑色素瘤，原代細胞(bao)|細胞(bao)系|細胞(bao)株|菌種；細胞(bao)庫管理規范，提供的細胞(bao)株背景(jing)清楚，提供參考文(wen)獻(xian)和培養(yang)條件！
SP 6.5 人眼脈洛膜黑色素瘤（人眼組(zu)織）英國引入
培養條件：
*培養基(ji)： DMEM，90%；胎牛(niu)血清10%。
培養條(tiao)件(jian)：37.0C carbon dioxide（CO2）,5%
傳(chuan)代方(fang)法： 收到(dao)細(xi)胞后，取出培養瓶(ping)在倒置顯微鏡下觀察細(xi)胞生長情況。
（一）如(ru)果細(xi)胞(bao)未長滿(man)，用(yong)75%酒精噴灑(sa)整個瓶消毒后放到超菌(jun)臺內(nei)，嚴格無(wu)菌(jun)操作，打開細(xi)胞(bao)培養(yang)瓶，吸出培養(yang)液(ye)，僅留下10ml培養(yang)液(ye)在瓶內(nei)繼續培養(yang)。
（二）如果細胞(bao)已長滿，即(ji)可進(jin)行傳(chuan)代培養。具體步驟如下：
1. 棄去培(pei)養液，用PBS（不含鈣，鎂離(li)子）洗(xi)1-2次。
2. 加(jia)1ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于(yu)培養(yang)瓶中，倒(dao)轉放于(yu)37度培養(yang)箱1-3分鐘預熱，然(ran)后又將培養(yang)瓶倒(dao)轉大約(yue)30秒后，在倒(dao)置顯(xian)微鏡下觀察細(xi)胞消化情況，若(ruo)細(xi)胞大部(bu)分變圓分散，輕敲(qiao)幾下培養(yang)培養(yang)瓶，細(xi)胞隨即脫(tuo)落下來。
3. 加入6-8ml*培養基，吸出，分(fen)到新(xin)的培養瓶中。一(yi)傳二。
注意(yi)：傳代后一半(ban)用我們的培養基，一半(ban)用你們的，以免細胞不適應而造
成生長不好。
凍(dong)存(cun)(cun)方法(fa)： 凍(dong)存(cun)(cun)液：95%*培養液，5%DMSO
儲存：液氮儲存
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