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McCoy 小鼠成纖維細胞 的詳細介紹
McCoy 小鼠成纖維細胞
培養條件：
*培養基(ji)：DMEM高糖培養基(ji)90%；胎牛血清(qing)10%。
培養條(tiao)件：37.0C carbon dioxide（CO2）,5%
傳代方法：
收到細胞(bao)后(hou)，取出培(pei)養瓶(ping)在倒置顯微(wei)鏡下觀察細胞(bao)生長情況。
（一）如果細胞未長滿，用75%酒精噴灑整個瓶消毒后(hou)放到超菌(jun)臺(tai)內，嚴格(ge)無菌(jun)操作(zuo)，打開細胞培(pei)養瓶，吸(xi)出培(pei)養液(ye)，僅留下10ml培(pei)養液(ye)在(zai)瓶內繼續培(pei)養。
（二）如(ru)果細胞(bao)已長滿，即可進(jin)行(xing)傳代培(pei)養。具體步驟如(ru)下：
1. 棄去培養液，用PBS（不含鈣，鎂離子）洗(xi)1-2次。
2. 加1ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于(yu)培養瓶(ping)(ping)中，倒轉放(fang)于(yu)37度培養箱(xiang)1-3分鐘預熱(re)，然后(hou)又將培養瓶(ping)(ping)倒轉大約(yue)30秒后(hou)，在(zai)倒置顯(xian)微鏡下(xia)觀察(cha)細胞消化情(qing)況(kuang)，若細胞大部(bu)分變圓分散，輕敲幾下(xia)培養培養瓶(ping)(ping)，細胞隨即脫落下(xia)來(lai)。
3. 加(jia)入6-8ml*培(pei)養基，吸出，分到(dao)新的培(pei)養瓶中(zhong)。1:3~1:6傳代；2~3天1次。
。
注(zhu)意：傳代后一半用我們(men)的培(pei)養基，一半用你們(men)的，以免(mian)細胞不適應而造
成生長不好。
凍(dong)存方法(fa)： 凍(dong)存液：基(ji)礎培養基(ji)+5%DMSO+20%FBS
儲存：液氮儲存
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