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MouseS 小鼠皮膚成纖維樣細胞 的詳細介紹
MouseS 小鼠皮膚成纖維樣細胞
培養條件:
*培(pei)養基:DMEM高(gao)糖培(pei)養基90%;胎牛血清10%。
培養條件:37.0C carbon dioxide(CO2),5%
傳代方法:
收(shou)到細胞(bao)后,取出培(pei)養(yang)瓶(ping)在(zai)倒置顯微鏡下觀察細胞(bao)生長情況。
(一(yi))如果細胞未長滿,用75%酒精(jing)噴(pen)灑整個瓶(ping)消毒(du)后(hou)放(fang)到(dao)超(chao)菌臺(tai)內,嚴(yan)格(ge)無菌操作,打開細胞培(pei)養(yang)瓶(ping),吸出培(pei)養(yang)液(ye),僅留(liu)下10ml培(pei)養(yang)液(ye)在瓶(ping)內繼續培(pei)養(yang)。
(二)如果細胞已(yi)長滿,即可(ke)進行傳代培(pei)養。具體(ti)步(bu)驟如下(xia):
1. 棄(qi)去培(pei)養(yang)液,用PBS(不含鈣(gai),鎂離子(zi))洗1-2次。
2. 加(jia)1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,倒轉放于37度培養箱1-3分(fen)(fen)鐘預熱,然后(hou)又將培養瓶倒轉大約30秒后(hou),在(zai)倒置(zhi)顯微鏡下(xia)觀察細胞(bao)(bao)消化情(qing)況,若細胞(bao)(bao)大部分(fen)(fen)變圓(yuan)分(fen)(fen)散,輕敲(qiao)幾下(xia)培養培養瓶,細胞(bao)(bao)隨即(ji)脫落下(xia)來。
3. 加入6-8ml*培養基,吸出(chu),分到(dao)新(xin)的培養瓶中。1:3~1:6傳代(dai);2~3天1次。
。
注意:傳代(dai)后一半用我們(men)的(de)培(pei)養基,一半用你(ni)們(men)的(de),以免細胞不適應而造(zao)
成生長不好。
凍存方法(fa): 凍存液(ye):基(ji)礎(chu)培(pei)養(yang)基(ji)+5%DMSO+20%FBS
儲存:液氮儲存
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