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Myoblast C2 小鼠成肌細胞 的詳細介紹
Myoblast C2 小鼠成肌細胞
培養條件:
*培(pei)養(yang)基: DMEM,90%;胎(tai)牛血清10%。
培養條(tiao)件(jian):37.0C carbon dioxide(CO2),5%
傳(chuan)代(dai)方法:收到細胞后,取出培養(yang)瓶在倒置顯(xian)微鏡下觀察細胞生(sheng)長情況。
(一)如果細(xi)胞(bao)未長滿(man),用75%酒(jiu)精噴(pen)灑整(zheng)個瓶消毒后放(fang)到超菌(jun)臺(tai)內(nei),嚴格無菌(jun)操作,打開細(xi)胞(bao)培養(yang)瓶,吸出培養(yang)液(ye),僅(jin)留下10ml培養(yang)液(ye)在瓶內(nei)繼續培養(yang)。
(二)如果細胞已長滿,即(ji)可進行傳(chuan)代培養(yang)。具體步驟如下:
1. 棄(qi)去培養液,用PBS(不(bu)含鈣,鎂離子)洗1-2次。
2. 加1ml消(xiao)(xiao)化(hua)液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培(pei)(pei)養瓶(ping)中,倒轉(zhuan)放于37度(du)培(pei)(pei)養箱1-3分(fen)(fen)鐘預(yu)熱,然(ran)后(hou)又(you)將(jiang)培(pei)(pei)養瓶(ping)倒轉(zhuan)大(da)約30秒后(hou),在倒置顯微(wei)鏡下觀(guan)察細(xi)胞(bao)(bao)消(xiao)(xiao)化(hua)情況,若細(xi)胞(bao)(bao)大(da)部分(fen)(fen)變圓分(fen)(fen)散,輕敲幾下培(pei)(pei)養培(pei)(pei)養瓶(ping),細(xi)胞(bao)(bao)隨(sui)即脫(tuo)落下來(lai)。
3. 加(jia)入(ru)6-8ml*培(pei)養基,吸出,分到(dao)新的培(pei)養瓶中。一傳二。
注(zhu)意:傳代后(hou)一(yi)半用(yong)我們的培養基,一(yi)半用(yong)你們的,以免細(xi)胞不適應而(er)造
成生長不好。
凍存(cun)方法: 凍存(cun)液(ye)(ye):95%*培養液(ye)(ye),5%DMSO
儲存:液氮儲存
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