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LTK 小鼠結締組織纖維細胞的詳細介紹
LTK 小鼠結締組織纖維細胞
培養條件:
*培養基:DMEM高糖(tang)培養基90%;胎牛(niu)血清10%。
培養條件:37.0C carbon dioxide(CO2),5%
傳代方法:
收到細胞后,取出培養瓶在(zai)倒置顯微鏡下觀察(cha)細胞生長情況。
(一)如果細胞(bao)未長滿,用75%酒精(jing)噴灑整個瓶(ping)(ping)消(xiao)毒后(hou)放到超菌臺內(nei),嚴格無菌操作,打開細胞(bao)培(pei)養(yang)(yang)瓶(ping)(ping),吸(xi)出培(pei)養(yang)(yang)液(ye),僅留下10ml培(pei)養(yang)(yang)液(ye)在瓶(ping)(ping)內(nei)繼續培(pei)養(yang)(yang)。
(二)如果細胞已長滿,即可進行傳代培養。具體步驟如下:
1. 棄去培養液,用PBS(不含鈣,鎂離(li)子(zi))洗1-2次。
2. 加1ml消(xiao)化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶(ping)(ping)中,倒(dao)轉放(fang)于37度培養箱1-3分鐘預熱(re),然后又將(jiang)培養瓶(ping)(ping)倒(dao)轉大(da)約30秒后,在倒(dao)置顯微(wei)鏡(jing)下(xia)觀(guan)察細(xi)胞(bao)消(xiao)化情(qing)況,若細(xi)胞(bao)大(da)部分變(bian)圓分散,輕敲幾下(xia)培養培養瓶(ping)(ping),細(xi)胞(bao)隨即脫落下(xia)來。
3. 加入6-8ml*培養基,吸(xi)出,分到新的培養瓶(ping)中。1:3~1:6傳代;2~3天1次。
。
注(zhu)意:傳代后一半(ban)(ban)用(yong)我(wo)們的培養基,一半(ban)(ban)用(yong)你們的,以免(mian)細胞不適應而(er)造
成生長不好。
凍存方(fang)法: 凍存液:基礎(chu)培(pei)養基+5%DMSO+20%FBS
儲存:液氮儲存
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