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MEF 小鼠胚胎成纖維細胞 的詳細介紹
MEF 小鼠胚胎成纖維細胞
培養條件：
*培養基：DMEM高糖培養基90%；胎(tai)牛血(xue)清10%。
培養條件：37.0C carbon dioxide（CO2）,5%
傳代方法：
收到細胞(bao)后，取出培養瓶在倒置顯微鏡下觀察(cha)細胞(bao)生長情(qing)況。
（一）如果(guo)細胞(bao)未長滿，用(yong)75%酒(jiu)精噴灑(sa)整個(ge)瓶消(xiao)毒后放到超(chao)菌臺內，嚴格無菌操作，打開細胞(bao)培(pei)(pei)養瓶，吸出培(pei)(pei)養液，僅留下10ml培(pei)(pei)養液在瓶內繼(ji)續培(pei)(pei)養。
（二(er)）如果細(xi)胞已(yi)長滿，即可進行(xing)傳代培養。具體步驟如下：
1. 棄(qi)去培養液(ye)，用PBS（不含鈣，鎂離(li)子）洗1-2次。
2. 加1ml消(xiao)(xiao)化(hua)液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培(pei)(pei)養瓶中，倒(dao)轉放(fang)于37度培(pei)(pei)養箱(xiang)1-3分鐘預熱，然后又(you)將培(pei)(pei)養瓶倒(dao)轉大(da)約30秒(miao)后，在倒(dao)置顯微鏡下觀察細(xi)胞(bao)消(xiao)(xiao)化(hua)情況，若細(xi)胞(bao)大(da)部(bu)分變(bian)圓(yuan)分散，輕敲幾下培(pei)(pei)養培(pei)(pei)養瓶，細(xi)胞(bao)隨即脫落下來。
3. 加入6-8ml*培養(yang)基(ji)，吸出，分到新(xin)的培養(yang)瓶中。1:3~1:6傳代；2~3天1次。
。
注意：傳代(dai)后一(yi)半(ban)用我們的培養基，一(yi)半(ban)用你們的，以免(mian)細(xi)胞不(bu)適應而(er)造
成生長不好。
凍存方法： 凍存液：基礎培(pei)養基+5%DMSO+20%FBS
儲存：液氮儲存
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