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Y2 小鼠成纖維細胞的詳細介紹
Y2 小鼠成纖維細胞
培養條件：
*培(pei)養(yang)基(ji)：DMEM高糖培(pei)養(yang)基(ji)90%；胎牛血清(qing)10%。
培(pei)養條件：37.0C carbon dioxide（CO2）,5%
傳代方法：
收到細胞后(hou)，取出培養瓶在倒(dao)置顯微鏡下觀察細胞生長(chang)情況。
（一）如(ru)果細胞未(wei)長滿，用75%酒精噴灑整個瓶(ping)消毒后(hou)放到(dao)超菌臺(tai)內(nei)，嚴格無菌操作，打開(kai)細胞培養瓶(ping)，吸出培養液，僅留下(xia)10ml培養液在瓶(ping)內(nei)繼續培養。
（二）如(ru)果細胞已長滿，即可進(jin)行傳代培養。具體步(bu)驟如(ru)下：
1. 棄(qi)去培養(yang)液，用PBS（不含鈣(gai)，鎂離子）洗(xi)1-2次。
2. 加1ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培(pei)養瓶(ping)中，倒轉放于37度培(pei)養箱(xiang)1-3分鐘(zhong)預熱，然(ran)后又將(jiang)培(pei)養瓶(ping)倒轉大約30秒后，在倒置顯(xian)微鏡下觀察細(xi)胞消化情(qing)況，若(ruo)細(xi)胞大部分變圓分散，輕敲幾下培(pei)養培(pei)養瓶(ping)，細(xi)胞隨即脫(tuo)落下來。
3. 加(jia)入6-8ml*培養基(ji)，吸出，分(fen)到(dao)新的培養瓶(ping)中(zhong)。1:3~1:6傳(chuan)代；2~3天(tian)1次。
。
注意：傳代(dai)后一半用(yong)我們的培養基，一半用(yong)你們的，以(yi)免細胞不適應而(er)造
成生長不好。
凍存方(fang)法(fa)： 凍存液：基(ji)礎培(pei)養(yang)基(ji)+5%DMSO+20%FBS
儲存：液氮儲存
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