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MFC 小鼠胃癌細胞,ATCC原(yuan)代細(xi)胞|細(xi)胞系|細(xi)胞株|菌種;細(xi)胞庫(ku)管理規范,提供的(de)細(xi)胞株背景清(qing)楚(chu),提供參(can)考文獻優培養條件!
MFC 小鼠胃癌細胞
培養條件:
*培養基(ji):DMEM高糖培養基(ji)90%;胎牛血(xue)清10%。
培養條件:37.0C carbon dioxide(CO2),5%
傳代方法:
收到細胞后,取出(chu)培(pei)養瓶(ping)在(zai)倒置顯微(wei)鏡下觀察(cha)細胞生長情況。
(一)如果(guo)細胞(bao)未長滿,用75%酒精噴灑(sa)整個(ge)瓶(ping)消毒后放到超菌(jun)臺內(nei),嚴格無菌(jun)操作,打開細胞(bao)培養(yang)(yang)瓶(ping),吸出(chu)培養(yang)(yang)液(ye),僅留下10ml培養(yang)(yang)液(ye)在(zai)瓶(ping)內(nei)繼續培養(yang)(yang)。
(二(er))如(ru)(ru)果細胞(bao)已長滿,即可進行傳代培養(yang)。具體步驟如(ru)(ru)下:
1. 棄去(qu)培(pei)養液,用PBS(不(bu)含(han)鈣,鎂離(li)子)洗(xi)1-2次。
2. 加(jia)1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培(pei)養(yang)瓶中,倒(dao)轉(zhuan)放(fang)于37度培(pei)養(yang)箱1-3分(fen)鐘預熱,然后(hou)又將培(pei)養(yang)瓶倒(dao)轉(zhuan)大約30秒后(hou),在倒(dao)置顯微(wei)鏡下(xia)觀(guan)察細胞消化情(qing)況(kuang),若細胞大部分(fen)變(bian)圓分(fen)散,輕敲幾下(xia)培(pei)養(yang)培(pei)養(yang)瓶,細胞隨即脫落下(xia)來。
3. 加入6-8ml*培(pei)養基(ji),吸出,分(fen)到新的培(pei)養瓶中。1:3~1:6傳代;2~3天1次。
。
注意:傳代后一半用我們(men)的(de)培養基,一半用你們(men)的(de),以免細胞不適應而造
成生長不好。
凍存(cun)方法: 凍存(cun)液:基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
儲存:液氮儲存
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