簡要(yao)描述:NRL2 黑化大家鼠肺成纖維(wei)樣細(xi)胞(bao),ATCC 細(xi)胞(bao)|細(xi)胞(bao)系|細(xi)胞(bao)株|腫(zhong)瘤細(xi)胞(bao)|細(xi)胞(bao)|貼壁細(xi)胞(bao)|懸浮細(xi)胞(bao)|,細(xi)胞(bao)庫管理規范,提供的(de)細(xi)胞(bao)株背景(jing)清楚,提供參(can)考文(wen)獻和(he)*培養(yang)條件(jian)
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NRL2 黑化大家鼠肺成纖維樣細胞,ATCC 細胞|細胞系|細胞株|腫瘤細胞|細胞|貼壁細胞|懸浮細胞|,細胞庫管理規范,提供的細胞株背景清楚,提供參考文獻和優培養條件
NRL2 黑化大家鼠肺成纖維樣細胞 的詳細介紹
培養條件:
*培(pei)養(yang)基(ji):DMEM高糖培(pei)養(yang)基(ji)90%;胎(tai)牛血清10%。
培養(yang)條件:37.0C carbon dioxide(CO2),5%
傳代方法:
收到細胞后,取出(chu)培養(yang)瓶在倒置顯微(wei)鏡(jing)下(xia)觀察細胞生長情況(kuang)。
(一(yi))如果細胞未長滿,用75%酒精(jing)噴灑整個瓶消毒后放到超菌臺內,嚴格無菌操(cao)作,打開細胞培養(yang)(yang)瓶,吸出培養(yang)(yang)液,僅留下10ml培養(yang)(yang)液在瓶內繼續培養(yang)(yang)。
(二)如(ru)果細胞已(yi)長滿,即(ji)可進行(xing)傳代培養。具體步驟(zou)如(ru)下:
1. 棄去培養液,用PBS(不含鈣,鎂(mei)離子(zi))洗1-2次。
2. 加1ml消(xiao)化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培(pei)(pei)養(yang)(yang)瓶(ping)中,倒轉放于37度培(pei)(pei)養(yang)(yang)箱1-3分鐘預熱,然后(hou)(hou)又將培(pei)(pei)養(yang)(yang)瓶(ping)倒轉大(da)約30秒后(hou)(hou),在(zai)倒置顯微鏡下(xia)觀察(cha)細(xi)胞(bao)消(xiao)化情況,若(ruo)細(xi)胞(bao)大(da)部分變圓分散,輕(qing)敲(qiao)幾下(xia)培(pei)(pei)養(yang)(yang)培(pei)(pei)養(yang)(yang)瓶(ping),細(xi)胞(bao)隨(sui)即脫落下(xia)來。
3. 加入6-8ml*培(pei)(pei)養基(ji),吸出,分到新的培(pei)(pei)養瓶中。1:3~1:6傳代;2~3天1次(ci)。
。
注意:傳代后(hou)一(yi)半(ban)用(yong)我們(men)的培(pei)養基,一(yi)半(ban)用(yong)你(ni)們(men)的,以免(mian)細(xi)胞不適應而造(zao)
成生長不好。
凍存方法: 凍存液:基礎培(pei)養基+5%DMSO+20%FBS
儲存:液氮儲存
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