細胞(bao)培(pei)(pei)養(yang)的(de)規(gui)模可大可小,你既(ji)可以(yi)使(shi)用(yong)生(sheng)物反應(ying)器(qi),也可以(yi)使(shi)用(yong)培(pei)(pei)養(yang)瓶(ping)或多孔板。如今,利用(yong)多孔板的(de)細胞(bao)培(pei)(pei)養(yang)模式正(zheng)倍受青睞,因為(wei)這有助(zhu)于研究(jiu)多個動態(tai)變量,減少(shao)實驗時間,并節約(yue)昂(ang)貴的(de)試劑。除(chu)了標準的(de)高通量微(wei)孔板,還(huan)有一些特(te)殊(shu)的(de)微(wei)孔板被開發出來,助(zhu)力3D和(he)器(qi)官型細胞(bao)培(pei)(pei)養(yang)。
市場(chang)上(shang)的(de)(de)細胞培(pei)養(yang)板(ban)可不(bu)少(shao),如何選(xuan)擇(ze)合適(shi)的(de)(de)呢?在(zai)這(zhe)篇文章中(zhong),BrandTech Scientific的(de)(de)產品(pin)專家介紹了(le)細胞培(pei)養(yang)中(zhong)塑(su)料制品(pin)的(de)(de)選(xuan)購要點。在(zai)他們看來(lai),我們需要重點考慮孔的(de)(de)數量、孔的(de)(de)形狀、微(wei)孔板(ban)顏色以及表面處理。
1. 孔的數量
大(da)多數(shu)用戶在組(zu)織培(pei)(pei)養瓶(ping)上開始組(zu)織培(pei)(pei)養。不過,許多應用也需(xu)(xu)(xu)要(yao)多孔(kong)板。理想的(de)(de)數(shu)量(liang)嘛,取決于(yu)你所需(xu)(xu)(xu)的(de)(de)通量(liang)水平,以(yi)及是否有機器(qi)人的(de)(de)協(xie)助。*手動(dong)地(di)向96孔(kong)板中添加試劑,這并(bing)非(fei)不可(ke)行,但(dan)有電(dian)動(dong)移液器(qi)或機器(qi)人的(de)(de)幫助當(dang)然更好(hao)。擴展到384孔(kong)板,就更加需(xu)(xu)(xu)要(yao)機器(qi)人,而1536孔(kong)板更是需(xu)(xu)(xu)要(yao)。當(dang)然,高密度多孔(kong)板的(de)(de)挑戰還(huan)在于(yu)分析小型化。
2. 孔的形狀
孔的(de)(de)底(di)部可以(yi)選擇平(ping)的(de)(de)、圓的(de)(de),或(huo)錐形(xing)的(de)(de),這取決(jue)于細胞(bao)(bao)(bao)類型和(he)下游應(ying)用。對于傳統的(de)(de)2D細胞(bao)(bao)(bao)培(pei)(pei)養(如(ru)HeLa或(huo)MDCK細胞(bao)(bao)(bao)),特別是需(xu)要(yao)對培(pei)(pei)養物進行成像或(huo)分(fen)光光度測(ce)定,通常平(ping)底(di)(F-bottom)。對于不存在接觸抑制的(de)(de)細胞(bao)(bao)(bao),弧形(xing)底(di)(C-bottom)也不錯。圓底(di)(U-bottom)適合(he)懸浮培(pei)(pei)養(如(ru)球體細胞(bao)(bao)(bao)培(pei)(pei)養),因為圓的(de)(de)表(biao)面讓細胞(bao)(bao)(bao)難(nan)以(yi)附著和(he)生長(chang)。而錐形(xing)底(di)很少用于細胞(bao)(bao)(bao)培(pei)(pei)養實驗,但在細胞(bao)(bao)(bao)沉淀時可能有用。
3. 微孔板的顏色
多(duo)(duo)孔板(ban)的(de)(de)顏色(se)也與應用(yong)(yong)息(xi)息(xi)相關。如(ru)果用(yong)(yong)相差顯(xian)(xian)微鏡或(huo)肉(rou)眼觀察細胞(bao),可選擇(ze)透(tou)明(ming)的(de)(de)多(duo)(duo)孔板(ban)。不(bu)過,對于可見(jian)光光譜以(yi)(yi)外的(de)(de)應用(yong)(yong)(如(ru)冷光或(huo)熒(ying)光),有(you)顏色(se)的(de)(de)多(duo)(duo)孔板(ban)(如(ru)白色(se)或(huo)黑色(se))則是必需的(de)(de)。在使(shi)(shi)用(yong)(yong)從頂部讀數的(de)(de)儀器(qi)時(shi),底(di)部應該是不(bu)透(tou)明(ming)的(de)(de),而(er)使(shi)(shi)用(yong)(yong)顯(xian)(xian)微鏡或(huo)底(di)部讀數的(de)(de)儀器(qi)時(shi),應選擇(ze)底(di)部透(tou)明(ming)的(de)(de)多(duo)(duo)孔板(ban)。冷光樣(yang)品通常(chang)選擇(ze)白色(se)表面(mian),以(yi)(yi)便zui大(da)限度(du)提(ti)高(gao)信號(hao)的(de)(de)反射率,而(er)大(da)于300 nm的(de)(de)熒(ying)光應用(yong)(yong)通常(chang)使(shi)(shi)用(yong)(yong)黑色(se)表面(mian),以(yi)(yi)吸(xi)收(shou)激(ji)發信號(hao)。有(you)顏色(se)的(de)(de)表面(mian)還可以(yi)(yi)防止相鄰孔之間的(de)(de)信號(hao)串擾。
4. 表面處理
選擇哪(na)種(zhong)細胞(bao)(bao)表(biao)面(mian)處理(li),這要取決于(yu)(yu)(yu)你培(pei)(pei)養(yang)的(de)(de)是(shi)懸浮(fu)細胞(bao)(bao)還是(shi)貼(tie)壁(bi)細胞(bao)(bao)。對于(yu)(yu)(yu)懸浮(fu)或(huo)球體細胞(bao)(bao)培(pei)(pei)養(yang),建議(yi)使用BRAND inertGrade™微(wei)孔(kong)板,它(ta)經過的(de)(de)疏(shu)水(shui)凝(ning)膠處理(li),可抑制細胞(bao)(bao)或(huo)蛋白附(fu)著。對于(yu)(yu)(yu)輕松附(fu)著的(de)(de)貼(tie)壁(bi)細胞(bao)(bao)(如HeLa),標準的(de)(de)組織培(pei)(pei)養(yang)表(biao)面(mian)就足夠了。對于(yu)(yu)(yu)那些貼(tie)壁(bi)有困難的(de)(de)細胞(bao)(bao)(如原代(dai)細胞(bao)(bao)),或(huo)涉及到嚴格洗滌的(de)(de)應用,建議(yi)使用BRAND的(de)(de)cellGrade™微(wei)孔(kong)板。這種(zhong)*的(de)(de)表(biao)面(mian)與多聚賴(lai)氨酸處理(li)的(de)(de)表(biao)面(mian)相(xiang)似(si),但它(ta)不是(shi)涂(tu)層,而是(shi)塑料(liao)性質的(de)(de)物理(li)變化,因此不需要冷藏。對于(yu)(yu)(yu)那些敏感細胞(bao)(bao)或(huo)血清量減少的(de)(de)細胞(bao)(bao),建議(yi)使用cellGrade™ plus表(biao)面(mian)。
zui后(hou),當然不(bu)能(neng)忽視培養容(rong)器的質量(liang)。這不(bu)僅僅指(zhi)微孔板,還包括與細(xi)胞接觸的一切,比(bi)如吸頭(tou),以避免(mian)細(xi)胞污染或死亡。
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