不同(tong)的細胞，喜歡的環境是不一樣的。

這個不僅僅是說培養基的(de)不同，還有就是細胞生長(chang)的(de)空間密度問(wen)題(ti)。

有(you)一些細(xi)(xi)胞(bao)(bao)是(shi)數(shu)量多一點比(bi)(bi)較好(hao)生(sheng)長(chang)，生(sheng)長(chang)狀態(tai)(tai)也比(bi)(bi)較好(hao)。這種一般是(shi)屬于生(sheng)長(chang)速度慢的(de)(de)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)。譬如內皮(pi)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)。而(er)有(you)一些是(shi)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)是(shi)數(shu)量少一點細(xi)(xi)胞(bao)(bao)狀態(tai)(tai)會生(sheng)長(chang)的(de)(de)比(bi)(bi)較好(hao)，譬如巨(ju)噬(shi)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)和某些腫瘤細(xi)(xi)胞(bao)(bao)。尤(you)其是(shi)巨(ju)噬(shi)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)，生(sheng)長(chang)速度非常得快，貼壁速度很快，所(suo)以(yi)傳代時(shi)就(jiu)應該留很少量的(de)(de)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)，這樣細(xi)(xi)胞(bao)(bao)狀態(tai)(tai)會比(bi)(bi)較好(hao)。并且(qie)巨(ju)噬(shi)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)比(bi)(bi)較喜(xi)歡扎堆(dui)生(sheng)長(chang)，而(er)堆(dui)與堆(dui)之間(jian)是(shi)有(you)空間(jian)的(de)(de)。如果(guo)長(chang)成(cheng)相(xiang)連在(zai)一起(qi)的(de)(de)一滿(man)片的(de)(de)時(shi)候，細(xi)(xi)胞(bao)(bao)形態(tai)(tai)基本上就(jiu)會差了，老化的(de)(de)會比(bi)(bi)較多，對后期實驗(yan)結果(guo)是(shi)不好(hao)的(de)(de)。所(suo)以(yi)在(zai)養細(xi)(xi)胞(bao)(bao)的(de)(de)時(shi)候應該摸索該細(xi)(xi)胞(bao)(bao)喜(xi)歡的(de)(de)生(sheng)長(chang)空間(jian)密度問題。

2.對于有些(xie)人總是會遇(yu)到養的(de)細(xi)胞(bao)形態怎么都不好的(de)問題。這(zhe)個(ge)其實是有一個(ge)方法(fa)可(ke)以改善(shan)的(de)。對于貼壁細(xi)胞(bao)，如果細(xi)胞(bao)形態不好，（或者細(xi)胞(bao)形態不清(qing)晰，表(biao)面似(si)有異物(wu)等）可(ke)以在傳代(dai)的(de)時候(hou)進行如下操(cao)作：

首先，倒掉(diao)舊的培(pei)(pei)養(yang)基，加(jia)入3ml新的培(pei)(pei)養(yang)基（有無血清的都可(ke)）洗滌一次，用滴管吸走，然后(hou)再加(jia)入3ml的培(pei)(pei)養(yang)基，進行預吹(chui)打(da)，控(kong)制吹(chui)打(da)力度，輕輕地(di)大概沿著(zhu)瓶底過一遍，然后(hou)吸走。這時侯再開始(shi)正式的消化(hua)、吹(chui)打(da)。（巨噬細胞(bao)我們只吹(chui)打(da)，不消化(hua)的）

其次，把吹打(da)下來的(de)(de)細(xi)胞(bao)懸液加入(ru)(ru)到新的(de)(de)培(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)瓶(ping)內(nei)，培(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)瓶(ping)事先加入(ru)(ru)培(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)基(ji)(ji)，放入(ru)(ru)培(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)箱內(nei)培(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)，按時間(jian)點觀(guan)察(cha)(cha)細(xi)胞(bao)貼壁情況(kuang)(kuang)。10分鐘觀(guan)察(cha)(cha)一(yi)次，20分鐘，30分鐘觀(guan)察(cha)(cha)一(yi)次。選擇一(yi)個時間(jian)點，已(yi)經有部(bu)分細(xi)胞(bao)貼壁的(de)(de)情況(kuang)(kuang)下，重(zhong)新置于潔凈臺，底面朝上迅速(su)倒(dao)出其中的(de)(de)培(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)基(ji)(ji)，加入(ru)(ru)3ml新培(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)基(ji)(ji)再(zai)輕(qing)(qing)輕(qing)(qing)洗一(yi)次。然后加入(ru)(ru)*培(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)基(ji)(ji)培(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)。后續觀(guan)察(cha)(cha)細(xi)胞(bao)生長情況(kuang)(kuang)以及形態(tai)。

如果一次效果還不理想，可重復多(duo)次。直到找到細胞形態。其(qi)中要注意(yi)，結合細胞喜歡的(de)生(sheng)長情(qing)況。喜歡多(duo)一點數量長得(de)好的(de)細胞你就等貼壁細胞比較多(duo)點的(de)時候再傳(chuan)。反(fan)之亦然。

3.關于培(pei)養瓶內加入培(pei)養基的量的問題。

這個是(shi)要(yao)靠自(zi)己去摸索(suo)你所養(yang)的(de)細胞(bao)(bao)的(de)。并不是(shi)小的(de)玻璃方(fang)瓶12ml，大方(fang)瓶14ml的(de)。有(you)些細胞(bao)(bao)反而是(shi)培養(yang)基少(shao)一點(dian)相(xiang)反細胞(bao)(bao)形態會長得比較好。（可能也是(shi)競爭很(hen)大，有(you)優勝劣汰吧。）對于(yu)生長速度快的(de)細胞(bao)(bao)，易(yi)生長的(de)細胞(bao)(bao)加(jia)少(shao)一點(dian)培養(yang)基細胞(bao)(bao)形態會更好。但(dan)是(shi)要(yao)注意換液(ye)掌握。

4.關于選擇培養瓶的問(wen)題。

有時發現生長(chang)速(su)度(du)快的細胞(bao)在玻(bo)(bo)璃(li)(li)瓶(ping)(ping)(ping)(ping)內生長(chang)的狀(zhuang)態(tai)會比一(yi)次性塑料瓶(ping)(ping)(ping)(ping)相對好一(yi)些。而對于同一(yi)種(zhong)細胞(bao)，在其生長(chang)旺盛快速(su)的時期(qi)在玻(bo)(bo)璃(li)(li)瓶(ping)(ping)(ping)(ping)內的生長(chang)狀(zhuang)態(tai)也比塑料瓶(ping)(ping)(ping)(ping)內好。這可能是因為(wei)塑料瓶(ping)(ping)(ping)(ping)比玻(bo)(bo)璃(li)(li)瓶(ping)(ping)(ping)(ping)更容易貼壁。生長(chang)速(su)度(du)快的細胞(bao)在塑料瓶(ping)(ping)(ping)(ping)這種(zhong)相對“更安逸”的環境里反而長(chang)得狀(zhuang)態(tai)不(bu)如(ru)玻(bo)(bo)璃(li)(li)瓶(ping)(ping)(ping)(ping)好。

所以對于生長(chang)速度(du)慢的細胞如果想要更(geng)(geng)漂亮的細胞狀態，塑料瓶(ping)比玻(bo)璃(li)瓶(ping)會好，對于生長(chang)速度(du)慢的細胞，玻(bo)璃(li)瓶(ping)則會更(geng)(geng)好。同樣，對于同一(yi)種細胞，在其生長(chang)速度(du)慢的時(shi)候，塑料瓶(ping)會好一(yi)點(dian)，比如剛剛復(fu)蘇的時(shi)候，或(huo)者原代培(pei)養(yang)的時(shi)候。而在其生長(chang)旺盛的時(shi)候，玻(bo)璃(li)瓶(ping)則相對會好一(yi)點(dian)。