細胞培養板的選擇
細胞培養板依底部形狀的不同可分為平底和圓底(U型和V型);培養孔的孔數有6、12、24、48、96、384、1536 孔等;根據材質的不同有Terasaki板和普通細胞培養板。具體選擇時根據培養細胞的類型、所需培養體積及不同的實驗目的而定。 (1)平底和圓底(U型和V型)培養板的區別和選擇 不同(tong)形(xing)狀的培養(yang)(yang)板(ban)有不同(tong)用(yong)(yong)途。培養(yang)(yang)細胞(bao),通常(chang)是選用(yong)(yong)平底的,這樣(yang)便于鏡下(xia)觀(guan)測、有明確的底面積、細胞(bao)培養(yang)(yang)液面高度相對一致。因此做MTT等實驗(yan)時(shi),無(wu)論是貼壁和懸浮細胞(bao),一般選用(yong)(yong)平底板(ban)。測吸(xi)光值一定要使(shi)用(yong)(yong)平底的培養(yang)(yang)板(ban)。要特別注意(yi)材質, 標示(shi)"Tissue Culture (TC) Treated"是養(yang)(yang)細胞(bao)用(yong)(yong)的。 U型(xing)或V型(xing)板(ban)(ban),一(yi)般(ban)在某些特殊要(yao)求(qiu)時(shi)(shi)才使用(yong)。如(ru)在免疫(yi)(yi)學方(fang)面(mian),當做兩種(zhong)不同淋巴細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)混合培(pei)養時(shi)(shi),需要(yao)二者相互接觸刺激,這(zhe)時(shi)(shi)一(yi)般(ban)會選(xuan)用(yong)U型(xing)板(ban)(ban),因為細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)會由(you)于重力的作用(yong)而(er)聚集(ji)在很小的范圍內內。圓底培(pei)養板(ban)(ban)還會用(yong)于同位素摻入的實驗,需要(yao)用(yong)細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)收集(ji)儀收集(ji)細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)的培(pei)養,如(ru)"混合淋巴細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)培(pei)養"等(deng)。V型(xing)板(ban)(ban)常用(yong)做細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)殺傷、免疫(yi)(yi)學血凝集(ji)實驗。細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)殺傷這(zhe)種(zhong)實驗也可(ke)用(yong)U型(xing)板(ban)(ban)替(ti)代(加入細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)后,低速離心(xin))。
(2)Terasaki板和普通細胞培養板的區別 Terasaki plate主要是用于晶體(ti)學研究,產品設計便于對晶體(ti)的觀察與(yu)結(jie)構(gou)分析(xi)。有兩種(zhong)sitting 和handing drop兩種(zhong)方法,兩種(zhong)方法應用產品的外(wai)形結(jie)構(gou)也不同。材(cai)料上選擇(ze)crystal class polymer ,特殊的材(cai)料有利觀察晶體(ti)結(jie)構(gou)。 細(xi)胞培養板主要是PS材(cai)料,材(cai)料是treated sufface,便(bian)于細(xi)胞貼壁生長與伸展。當然還(huan)有浮(fu)游(you)細(xi)胞的(de)生長材(cai)料,同時還(huan)有low binding surface
(3)細胞培養板與酶標板的區別 酶標(biao)(biao)板一般(ban)要(yao)(yao)(yao)(yao)比(bi)細胞(bao)培(pei)(pei)(pei)養板貴,細胞(bao)板主要(yao)(yao)(yao)(yao)做細胞(bao)培(pei)(pei)(pei)養,也可(ke)以用來測蛋白濃度;酶標(biao)(biao)板包括(kuo)包被板和反應(ying)板,一般(ban)不(bu)用做細胞(bao)培(pei)(pei)(pei)養,它主要(yao)(yao)(yao)(yao)做免疫酶聯反應(ying)后的蛋白檢測,需(xu)要(yao)(yao)(yao)(yao)更高的要(yao)(yao)(yao)(yao)求和特(te)定的酶標(biao)(biao)工作液。
(4)常用不同培養板的孔底面積及推薦加液量 不同孔(kong)板所(suo)加(jia)培養(yang)液(ye)的(de)液(ye)面都不宜(yi)太(tai)深,一般在2~3mm范圍,結(jie)合不同孔(kong)的(de)底面積(ji)就可算出各培養(yang)孔(kong)的(de)適宜(yi)加(jia)液(ye)量(liang)(參考(kao)下表)。若加(jia)液(ye)量(liang)過多(duo)會影響氣體(ti)(氧氣)交換,而且在搬動過程中易(yi)溢出造成污染。具體(ti)所(suo)加(jia)細胞密度依實驗的(de)目的(de)不同靈活(huo)掌握。 常用的培養器皿
注:各種單層生長的細(xi)胞在培養皿中長滿的細(xi)胞數(shu),主要取決(jue)于器皿底表(biao)面積和細(xi)胞體積的大小(xiao)。上表(biao)以(yi)Hela細(xi)胞為例給(gei)出(chu)的可獲細(xi)胞量僅作參考。 |
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