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黑色素瘤細胞株培養條件:
*培(pei)養基: DMEM高糖 10%胎牛血清
培養條件:37.0C carbon dioxide(CO2),5%
黑色素瘤細胞株傳代方法:
收到細(xi)胞(bao)后,取(qu)出(chu)培養(yang)瓶在倒置顯微鏡下觀察細(xi)胞(bao)生長情況。
(一)如果細胞未長滿,用75%酒精(jing)噴灑整個(ge)瓶(ping)消毒后放到超菌臺內(nei),嚴(yan)格無菌操作(zuo),打開細胞培(pei)養(yang)(yang)瓶(ping),吸出培(pei)養(yang)(yang)液,僅留下(xia)10ml培(pei)養(yang)(yang)液在(zai)瓶(ping)內(nei)繼續培(pei)養(yang)(yang)。
(二)如果(guo)細胞已長滿(man),即可進(jin)行傳(chuan)代培養。具體步驟如下:
1. 棄去(qu)培養(yang)液,用(yong)PBS(不含鈣,鎂離子)洗1-2次。
2. 加(jia)1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培(pei)(pei)養(yang)瓶(ping)中(zhong),倒(dao)轉(zhuan)放于37度培(pei)(pei)養(yang)箱1-3分鐘預熱(re),然(ran)后又將(jiang)培(pei)(pei)養(yang)瓶(ping)倒(dao)轉(zhuan)大約(yue)30秒后,在倒(dao)置顯微鏡下觀察細(xi)(xi)胞(bao)消化情況,若(ruo)細(xi)(xi)胞(bao)大部分變圓分散,輕敲幾下培(pei)(pei)養(yang)培(pei)(pei)養(yang)瓶(ping),細(xi)(xi)胞(bao)隨(sui)即脫落下來(lai)。
3. 加(jia)入6-8ml*培(pei)養基,吸出,分(fen)到新的培(pei)養瓶中。一傳(chuan)二。
注意:傳(chuan)代后(hou)一半(ban)用我們的(de)(de)培(pei)養基,一半(ban)用你們的(de)(de),以(yi)免細胞不適應而造
成生長不好。
凍存方(fang)法:凍存液:95%*培養液,5%DMSO
儲存:液氮儲存
來自ATCC細(xi)(xi)胞,所有出入(ru)庫(ku)細(xi)(xi)胞均經過嚴(yan)格的細(xi)(xi)胞質(zhi)量檢測,確保(bao)細(xi)(xi)胞無污染,符合(he)檢測合(he)格標準。歡迎來詢價(jia)詳談(tan)。
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