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VE 正常人(ren)血管內皮細(xi)胞(bao)
培養條件(jian):
*培(pei)養(yang)基:DMEM高(gao)糖培(pei)養(yang)基90%;胎牛血清(qing)10%。
培養條件:37.0C carbon dioxide(CO2),5%
VE 正常人血管內(nei)皮(pi)細胞
傳代方法:
收(shou)到細胞后(hou),取出(chu)培養(yang)瓶在(zai)倒置顯(xian)微鏡下觀察細胞生長情況(kuang)。
(一)如果(guo)細(xi)胞(bao)未(wei)長滿(man),用(yong)75%酒(jiu)精(jing)噴灑整個瓶(ping)消毒后放(fang)到超菌(jun)臺內,嚴(yan)格無菌(jun)操作,打開(kai)細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)瓶(ping),吸出培(pei)養(yang)液,僅留下10ml培(pei)養(yang)液在(zai)瓶(ping)內繼續(xu)培(pei)養(yang)。
(二)如(ru)果細胞已長(chang)滿,即可進行傳(chuan)代(dai)培養(yang)。具體步驟如(ru)下(xia):
1. 棄去培養(yang)液(ye),用PBS(不含鈣,鎂離子)洗1-2次。
2. 加1ml消化(hua)液(ye)(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培(pei)(pei)(pei)養瓶中,倒轉放于37度(du)培(pei)(pei)(pei)養箱1-3分(fen)鐘(zhong)預熱(re),然后又將培(pei)(pei)(pei)養瓶倒轉大約30秒后,在倒置顯微鏡下觀察細胞消化(hua)情況,若細胞大部分(fen)變圓(yuan)分(fen)散,輕敲幾下培(pei)(pei)(pei)養培(pei)(pei)(pei)養瓶,細胞隨即脫落下來。
3. 加(jia)入(ru)6-8ml*培養(yang)基,吸(xi)出(chu),分到新(xin)的培養(yang)瓶中。1:3~1:6傳代(dai);2~3天1次。
。
VE 正常人血管內皮細胞(bao)
注(zhu)意:傳代后(hou)一半用(yong)我們(men)的培養基,一半用(yong)你們(men)的,以免細胞不適(shi)應而(er)造
成(cheng)生長不好。
凍存方法(fa): 凍存液:基(ji)礎(chu)培養基(ji)+5%DMSO+20%FBS
儲存:液氮儲存
ATCC 細胞|細胞系|細胞株|腫瘤細胞(bao)(bao)|細胞(bao)(bao)|貼壁細胞(bao)(bao)|懸浮細胞(bao)(bao)|,細胞(bao)(bao)庫管理規范(fan),提(ti)供的細胞(bao)(bao)株背(bei)景(jing)清楚(chu),提(ti)供參考文(wen)獻和(he)優(you)培養條件(jian)
VE 正常人血管內皮細胞(bao)
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