簡要描述(shu):BE(2)-M17M17 人神經母(mu)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)瘤(liu)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao),原代細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)|細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)系|細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)株|菌種(zhong);細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)庫(ku)管理(li)規范(fan),提供的細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)株背景清楚,提供參考文獻和*培養條件!
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BE(2)-M17M17 人神經母細胞瘤細胞
培養條件:
*培養基(ji)(ji):DMEM高糖(tang)培養基(ji)(ji)90%;胎牛血(xue)清(qing)10%。
培(pei)養條件:37.0C carbon dioxide(CO2),5%
BE(2)-M17M17 人神經母細胞瘤細胞傳(chuan)代方法(fa):
收(shou)到細(xi)胞后,取出(chu)培養瓶(ping)在倒置顯微鏡下觀察細(xi)胞生長(chang)情況。
(一)如果(guo)細(xi)胞(bao)未長滿,用75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超菌(jun)臺內(nei),嚴格無菌(jun)操作,打開(kai)細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)(yang)瓶,吸出(chu)培(pei)養(yang)(yang)液(ye),僅留下10ml培(pei)養(yang)(yang)液(ye)在瓶內(nei)繼續培(pei)養(yang)(yang)。
(二)如果細胞(bao)已長滿,即可進行傳代培(pei)養。具體步驟如下:
1. 棄去培養液,用PBS(不(bu)含鈣(gai),鎂離子(zi))洗1-2次。
2. 加(jia)1ml消化(hua)液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于(yu)培(pei)養(yang)瓶(ping)中,倒轉放(fang)于(yu)37度培(pei)養(yang)箱1-3分(fen)鐘預熱(re),然(ran)后(hou)又(you)將(jiang)培(pei)養(yang)瓶(ping)倒轉大(da)約(yue)30秒后(hou),在倒置顯(xian)微鏡(jing)下觀察細胞消化(hua)情況(kuang),若細胞大(da)部分(fen)變圓分(fen)散,輕(qing)敲幾下培(pei)養(yang)培(pei)養(yang)瓶(ping),細胞隨(sui)即脫落(luo)下來(lai)。
3. 加入6-8ml*培養基,吸出,分到新的培養瓶中。1:3~1:6傳代;2~3天1次。
。
BE(2)-M17M17
注意(yi):傳代后一半用(yong)我們的(de)培(pei)養基,一半用(yong)你們的(de),以免細胞不適應而造
成生長不好。
凍(dong)存(cun)方法(fa): 凍(dong)存(cun)液(ye):基(ji)礎培養基(ji)+5%DMSO+20%FBS
儲存:液氮儲存
BE(2)-M17M17
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