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293-L.P細胞, 人胚腎細胞
培養條件:
*培養基:DMEM高糖培養基90%;胎牛血清(qing)10%。
培養條件:37.0C carbon dioxide(CO2),5%
293-L.P細胞, 人胚腎細胞
傳代方法長:
收到細胞后,取出培養瓶在倒置(zhi)顯微(wei)鏡下觀察(cha)細胞生長情況。
(一)如果細胞(bao)未滿,用75%酒精(jing)噴灑(sa)整個瓶(ping)消毒后放到超菌臺內,嚴格無菌操(cao)作,打(da)開細胞(bao)培養(yang)瓶(ping),吸(xi)出培養(yang)液,僅留下10ml培養(yang)液在瓶(ping)內繼(ji)續(xu)培養(yang)。
(二(er))如果細胞(bao)已長滿,即(ji)可(ke)進行(xing)傳代培養。具體(ti)步驟(zou)如下:
1. 棄去培養(yang)液,用PBS(不含鈣(gai),鎂離子(zi))洗1-2次(ci)。
2. 加1ml消化(hua)液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培(pei)養(yang)(yang)瓶(ping)中,倒(dao)轉放于37度培(pei)養(yang)(yang)箱1-3分(fen)(fen)鐘預熱,然后又將(jiang)培(pei)養(yang)(yang)瓶(ping)倒(dao)轉大(da)約(yue)30秒后,在倒(dao)置顯微鏡下觀(guan)察細胞消化(hua)情況(kuang),若(ruo)細胞大(da)部分(fen)(fen)變圓(yuan)分(fen)(fen)散,輕敲幾(ji)下培(pei)養(yang)(yang)培(pei)養(yang)(yang)瓶(ping),細胞隨即脫落下來。
3. 加(jia)入6-8ml*培養(yang)基,吸出,分到新的(de)培養(yang)瓶中(zhong)。1:3~1:6傳代(dai);2~3天1次。
。
注意:傳代后一(yi)半(ban)用(yong)我(wo)們(men)的培養基(ji),一(yi)半(ban)用(yong)你們(men)的,以免細胞(bao)不適應而(er)造
成生長不好。
凍(dong)存方法: 凍(dong)存液:基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
儲存:液氮儲存
293-L.P. 人胚(pei)腎細胞(bao)
ATCC 細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)|細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)系|細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)株|腫瘤細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)|細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)|貼壁細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)|懸浮(fu)細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)|,細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)庫(ku)管理規范,提供(gong)的(de)細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)株背景(jing)清楚,提供(gong)參考文獻和(he)培養(yang)條(tiao)件
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