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HEK293-T細胞, 人胚腎細胞
培養條件(jian):
*培養基(ji):DMEM高糖培養基(ji)90%;胎牛血清10%。
培(pei)養條(tiao)件:37.0C carbon dioxide(CO2),5%
HEK293-T細胞, 人胚腎細胞
傳代方法:
收到(dao)細胞后,取出培(pei)養瓶在倒(dao)置顯(xian)微鏡下觀察細胞生長(chang)情況。
(一)如(ru)果細胞未長滿(man),用75%酒精噴灑整(zheng)個瓶(ping)消毒后放到超(chao)菌(jun)臺內(nei),嚴格無(wu)菌(jun)操作,打(da)開細胞培養(yang)瓶(ping),吸出培養(yang)液(ye),僅留下10ml培養(yang)液(ye)在瓶(ping)內(nei)繼續(xu)培養(yang)。
(二)如(ru)果細(xi)胞已長滿,即(ji)可進行傳(chuan)代培養。具體步驟如(ru)下:
1. 棄去培養(yang)液,用(yong)PBS(不含(han)鈣,鎂離子)洗1-2次。
2. 加1ml消化(hua)液(ye)(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yang)瓶中,倒(dao)轉(zhuan)放于37度培養(yang)箱(xiang)1-3分鐘預熱,然后又將培養(yang)瓶倒(dao)轉(zhuan)大約30秒后,在倒(dao)置顯微鏡下觀(guan)察(cha)細胞消化(hua)情況,若細胞大部分變圓(yuan)分散,輕敲幾下培養(yang)培養(yang)瓶,細胞隨即脫(tuo)落下來。
3. 加入6-8ml*培養基,吸出,分到新的(de)培養瓶中。1:3~1:6傳代(dai);2~3天1次。
。
注(zhu)意:傳(chuan)代后(hou)一半用(yong)我們(men)的培養基,一半用(yong)你(ni)們(men)的,以免(mian)細胞不(bu)適應而造
成生長(chang)不好。
凍存方法: 凍存液(ye):基礎培(pei)養基+5%DMSO+20%FBS
儲(chu)存:液氮儲(chu)存
ATCC 細(xi)胞|細胞系|細胞株|腫瘤細胞|細胞(bao)(bao)|貼壁細胞(bao)(bao)|懸浮細胞(bao)(bao)|,細胞(bao)(bao)庫管(guan)理規范,提供的細胞株背(bei)景清楚,提供參考文獻和培(pei)養(yang)條件
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