簡要描(miao)述:AD293細胞, 人胚腎細胞ATCC 細(xi)(xi)胞(bao)(bao)|細(xi)(xi)胞(bao)(bao)系|細(xi)(xi)胞(bao)(bao)株(zhu)|腫瘤細(xi)(xi)胞(bao)(bao)|細(xi)(xi)胞(bao)(bao)|貼壁細(xi)(xi)胞(bao)(bao)|懸浮細(xi)(xi)胞(bao)(bao)|,細(xi)(xi)胞(bao)(bao)庫管理規范,提供的細(xi)(xi)胞(bao)(bao)株(zhu)背景清楚(chu),提供參考文獻(xian)和培養條件
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AD293細胞, 人胚腎細胞
培養條件:
*培養基(ji):DMEM高糖培養基(ji)90%;胎牛血清(qing)10%。
培養(yang)條件:37.0C carbon dioxide(CO2),5%
AD293細胞, 人胚腎細胞
傳代方法:
收到細(xi)胞后,取出培養(yang)瓶在倒置顯(xian)微鏡(jing)下觀(guan)察細(xi)胞生長(chang)情況(kuang)。
(一)如(ru)果細(xi)胞未長滿,用(yong)75%酒精噴灑整個瓶(ping)(ping)消毒后放到超菌(jun)臺內,嚴格無菌(jun)操作,打開細(xi)胞培養(yang)(yang)瓶(ping)(ping),吸(xi)出培養(yang)(yang)液,僅(jin)留下10ml培養(yang)(yang)液在(zai)瓶(ping)(ping)內繼續培養(yang)(yang)。
(二)如(ru)果細胞已長滿,即可(ke)進行傳代培養。具體步驟(zou)如(ru)下:
1. 棄去培養液,用(yong)PBS(不含鈣,鎂離子(zi))洗1-2次。
2. 加1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于(yu)培(pei)養瓶(ping)(ping)中,倒(dao)(dao)轉放(fang)于(yu)37度培(pei)養箱1-3分鐘(zhong)預(yu)熱,然后又將培(pei)養瓶(ping)(ping)倒(dao)(dao)轉大(da)約30秒后,在倒(dao)(dao)置顯(xian)微鏡下觀察細(xi)胞(bao)消化情況,若細(xi)胞(bao)大(da)部分變圓(yuan)分散,輕(qing)敲(qiao)幾下培(pei)養培(pei)養瓶(ping)(ping),細(xi)胞(bao)隨即脫落下來。
3. 加入6-8ml*培(pei)養基,吸出(chu),分到新的培(pei)養瓶(ping)中。1:3~1:6傳代;2~3天1次。
。
注(zhu)意:傳代后一半用我(wo)們的培養基,一半用你們的,以免細胞不適應(ying)而造
成生長不好。
凍(dong)(dong)存方法: 凍(dong)(dong)存液:基(ji)礎培養(yang)基(ji)+5%DMSO+20%FBS
儲(chu)存:液氮儲(chu)存
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