簡要描(miao)述(shu):M14 人黑色素瘤細胞上(shang)海復(fu)祥生物提供(gong) ATCC 細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)|細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)系|細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)株|腫瘤細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)|細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)|貼壁(bi)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)|懸浮細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)|,細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)庫管理規范,提供(gong)的細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)株背(bei)景清楚,提供(gong)參考文(wen)獻和(he)培養條件(jian),上(shang)有細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)照片(pian),xiangfbio.歡(huan)迎各位老師!
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M14 人黑色素瘤細胞
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M14 人黑色素瘤細胞
培養條件:
*培(pei)(pei)養基:DMEM高糖培(pei)(pei)養基90%;胎牛(niu)血清10%。
培養條件:37.0C carbon dioxide(CO2),5%
傳代方法:
收到細胞后,取出培養瓶(ping)在倒置(zhi)顯(xian)微鏡下觀(guan)察(cha)細胞生(sheng)長(chang)情(qing)況(kuang)。
(一)如果(guo)細胞(bao)未長(chang)滿,用75%酒精噴灑整個瓶(ping)消(xiao)毒后放到超菌臺內,嚴格無菌操(cao)作,打開細胞(bao)培(pei)養瓶(ping),吸(xi)出培(pei)養液(ye),僅留下(xia)10ml培(pei)養液(ye)在瓶(ping)內繼續培(pei)養。
(二)如果細胞(bao)已長滿,即(ji)可進行傳代培養(yang)。具體步驟(zou)如下:
1. 棄去培養液,用PBS(不含鈣(gai),鎂離子)洗1-2次。
2. 加1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培(pei)(pei)(pei)養瓶(ping)中,倒(dao)轉(zhuan)放于37度培(pei)(pei)(pei)養箱1-3分鐘預熱,然(ran)后又將培(pei)(pei)(pei)養瓶(ping)倒(dao)轉(zhuan)大約30秒(miao)后,在倒(dao)置(zhi)顯微鏡下(xia)觀(guan)察細(xi)胞消化情況,若細(xi)胞大部分變(bian)圓分散,輕敲(qiao)幾下(xia)培(pei)(pei)(pei)養培(pei)(pei)(pei)養瓶(ping),細(xi)胞隨即脫(tuo)落(luo)下(xia)來。
3. 加入(ru)6-8ml*培(pei)養基,吸出,分到(dao)新的(de)培(pei)養瓶中(zhong)。1:3~1:6傳代;2~3天1次。
。
注意:傳(chuan)代后一半(ban)用(yong)我們的培養基,一半(ban)用(yong)你們的,以免(mian)細胞(bao)不適應而造
成生長不好。
凍存方法: 凍存液(ye):基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
儲存:液氮儲存
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