簡要(yao)描(miao)述(shu):PT-K75 豬鼻甲黏膜成纖維細胞 上海復祥生物提(ti)供 ATCC 細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)|細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)系|細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)株|腫瘤細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)|細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)|貼壁細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)|懸浮細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)|,細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)庫管理規(gui)范(fan),提(ti)供的(de)細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)株背景清楚,提(ti)供參考文(wen)獻和(he)培(pei)養條件,上有細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)照片,歡(huan)迎各位老師咨詢!
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PT-K75 豬鼻甲黏膜成纖維細胞
PT-K75 豬鼻甲黏膜成纖維細胞
細胞株名稱:豬鼻甲(jia)黏膜(mo)成纖維細胞(PT-K75)
種屬:豬(zhu)
組(zu)織(zhi)來源:豬(zhu)鼻
生長特性:成纖(xian)維細胞樣,貼壁生長
形態(tai)特征:上皮細胞
培養條件:
*培養基:DMEM培養基(ji)(GIBCO),90%;進口優質胎(tai)牛血清,10%,雙抗,1%。
培養條件:37℃ carbon dioxide(CO2),5%
傳代方法:
收到細(xi)胞(bao)(bao)后,取出培養瓶在顯微(wei)鏡下(xia)觀察(cha)細(xi)胞(bao)(bao)生長(chang)情況。 (一)如果細(xi)胞(bao)(bao)未超(chao)(chao)過80%匯合度(du)時,用75%酒精噴灑整個瓶身消毒(du)后放(fang)到超(chao)(chao)凈臺內,嚴格無(wu)菌操作,打開細(xi)胞(bao)(bao)培養瓶,吸(xi)出培養液,僅留下(xia)10ml培養液在瓶內繼續培養。
(二(er))如果細胞已超(chao)過80%匯合度時,可根據(ju)情況進行傳代培養。具(ju)體(ti)步(bu)驟如下:
1. 棄去(qu)培養液,用PBS(不含鈣,鎂離子)潤(run)洗(xi)1-2次。
2. 加1ml消(xiao)(xiao)化(hua)液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培(pei)(pei)養(yang)瓶中,置37℃培(pei)(pei)養(yang)箱(xiang)中1-3分鐘預熱,然后(hou)在顯微鏡下(xia)觀察細胞消(xiao)(xiao)化(hua)情況,若細胞大部(bu)分變圓(yuan)分散,迅速拿回操作(zuo)臺,輕敲幾(ji)下(xia)培(pei)(pei)養(yang)瓶后(hou)加少量培(pei)(pei)養(yang)基(ji)終止消(xiao)(xiao)化(hua)。
3. 按6-8ml/瓶補加(jia)培(pei)養(yang)基(ji),輕輕打(da)勻后(hou)(hou)吸出,在(zai)1000RPM條件下離心5分鐘,棄去(qu)上清,補加(jia)1-2ml培(pei)養(yang)液后(hou)(hou)吹(chui)勻。 4. 將細胞懸(xuan)液按1:2到1:5的(de)(de)比例分到新(xin)的(de)(de)含5ml培(pei)養(yang)基(ji)的(de)(de)新(xin)皿中(zhong)或者培(pei)養(yang)瓶中(zhong)。 5. 2-3天換液一(yi)次。
注意:收到細胞后將細胞放入37度培(pei)養(yang)箱(xiang)中預(yu)溫1-2小時(shi)后再(zai)(zai)做處(chu)理,以穩定細胞狀(zhuang)態。傳代后細胞應(ying)該用新鮮的(de)培(pei)養(yang)液(ye),原(yuan)瓶的(de)培(pei)養(yang)液(ye)不能再(zai)(zai)使用。在運輸過程(cheng)中可(ke)能會導致一些貼壁(bi)不牢的細胞(bao)發生部分脫落,可(ke)離心吹(chui)打后重新(xin)種(zhong)入瓶中培養。(收到細胞后(hou)3天(tian)內發現細胞異常請及時(shi)拍照并聯系(xi)
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