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簡要描述：WSU-HN30人(ren)口(kou)腔鱗狀細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao) 上海復(fu)祥生物提(ti)供 ATCC 細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)|細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)系|細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)株(zhu)|腫瘤細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)|細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)|貼壁細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)|懸浮(fu)細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)|,細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)庫管(guan)理規(gui)范,提(ti)供的細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)株(zhu)背(bei)景清楚,提(ti)供參考(kao)文獻和培養條(tiao)件,網站上有細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)照片(pian),歡迎各位老(lao)師(shi)咨詢!
產品型號：WSU-HN30廠商性質：生產廠家 更新時間：2023-11-16訪 問(wen) 量：3227 產品分類
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WSU-HN30人口腔鱗狀細胞
細胞培養說明書
一、細胞培養條件(jian)
細胞(bao)英文名(ming)稱 | WSU-HN30 | 細胞中文名稱 | 人口腔鱗狀細胞 |
形態特性 | 上皮(pi)樣(yang) | 生長特性 | 貼壁生(sheng)長(chang) |
培(pei)養體系 | DMEM+10%FBS | ||
傳代方法 | 1:2--1:4傳代 | 傳代情(qing)況 | 2~3天(tian)1次 |
凍存條件 | 細胞庫無血清凍(dong)存(cun)液 | ||
備注 | 收集瓶中培養基，留作過(guo)渡培養。 | ||
二、細胞收到后處(chu)理
細胞(bao)在培(pei)養(yang)瓶中培(pei)養(yang)至良好狀態(tai)后灌(guan)滿(man)*培(pei)養(yang)液并封好瓶口是細胞(bao)運輸的辦法。收到細胞回到自己的實驗室后，先打開外包裝，用75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超凈臺內，嚴格無菌操作，培養箱靜置2-4小時。鏡下觀察：未超過80%匯合度時，可將瓶裝的*培養液收集至離心管中，加入6ml*培養基，放入37℃、5%CO2孵箱培養；超過80%匯合度時，根據情況傳代或者凍存，具體操作見細胞培養步驟。（注意發貨的是密封培養瓶的話，處理完后放入培養箱培養記得培養瓶蓋子擰松，傳代后建議一瓶用原瓶里面的*培養基，另外一瓶用自己配的*培養基）
三、細胞培養步驟
1）復蘇細胞(bao)：將(jiang)含有1mL細胞(bao)懸(xuan)液的凍存管在37℃水浴中迅速(su)搖晃解凍，加(jia)入(ru)(ru)5mL培(pei)養基(ji)混合均勻。在1000RPM條(tiao)件下離(li)心5分(fen)鐘，棄去上清液，補(bu)加(jia)4-6mL*培(pei)養基(ji)后吹勻。然(ran)后將(jiang)所有細胞(bao)懸(xuan)液加(jia)入(ru)(ru)培(pei)養瓶(ping)中培(pei)養過夜（或將(jiang)細胞(bao)懸(xuan)液加(jia)入(ru)(ru)6cm皿中），培(pei)養過夜。第二天換液并檢查細胞(bao)密度。
2）細胞傳代(dai)：如果細胞密(mi)度達80%-90%，即可(ke)進行傳代(dai)培養。
1、對于貼(tie)壁細(xi)胞，傳代可參(can)考以下(xia)方法：
1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離(li)子的PBS潤洗細胞(bao)1-2次。
2. 加1-2ml消(xiao)(xiao)(xiao)化(hua)液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于(yu)培養瓶中，置于(yu)37℃培養箱(xiang)中消(xiao)(xiao)(xiao)化(hua)1-2min，然后在顯微鏡下(xia)觀察(cha)細胞(bao)消(xiao)(xiao)(xiao)化(hua)情況，若細胞(bao)大部分變(bian)圓并脫落，迅速拿回(hui)操作臺，輕敲(qiao)幾下(xia)培養瓶后加5ml以上含10%血清的*培養基終止消(xiao)(xiao)(xiao)化(hua)。
3.輕(qing)(qing)輕(qing)(qing)吹打(da)細胞，*脫(tuo)落后吸出，在1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄去上(shang)清液，補加(jia)1-2mL培養液后吹勻(yun)。
4. 按5-6ml/瓶(ping)補加培養(yang)液，將細胞懸液按1：2到1：5的比例(li)分到新的含(han)5-6 ml培養(yang)液的新皿中(zhong)或者瓶(ping)中(zhong)。
PS：若客戶收到(dao)2ml小管細胞，收(shou)到細胞后(hou)，用75%酒(jiu)精(jing)噴灑整個管子消毒(du)后放(fang)到超凈臺或(huo)安全柜內，嚴格無菌操作；將小管細胞轉移(yi)至T25培養(yang)瓶或(huo)6cm培養皿，加入5ml左右*培(pei)養(yang)基混勻(yun)，放入(ru)培(pei)養(yang)箱過夜培(pei)養(yang)后查看細胞(bao)密度：若密度(du)未超(chao)過(guo)80%，換液(ye)繼續培養，視情況傳(chuan)代或者凍存(cun)。若密度超過80%，可直接進(jin)行傳代（方法同上）。
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