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HaCaT 人永生化表皮細胞
細胞株名稱:HaCaT 人永生化表皮細胞
種屬:人
性別:
組織來源:皮膚
生長特性:貼壁生長
形態特征:上皮細(xi)胞(bao)樣
*培養基:
DMEM(內含2mM L-glutamine)+15%胎牛血清
培養條(tiao)件:37.0C carbon dioxide(CO2),5%
收到細胞(bao)后,取(qu)出(chu)培養(yang)瓶在倒置顯微鏡下觀(guan)察細胞(bao)生長(chang)情況。
(一)如(ru)果(guo)細胞未長滿,用75%酒精噴灑整(zheng)個瓶(ping)消毒后(hou)放到超(chao)菌臺內,嚴格無(wu)菌操作(zuo),打開細胞培養(yang)瓶(ping),吸出培養(yang)液(ye),僅留下10ml培養(yang)液(ye)在瓶(ping)內繼(ji)續培養(yang)。
(二)如果(guo)細胞已長滿,即可進行傳代培養。具體步驟如下:
1. 棄去培(pei)養液,用PBS(不含鈣,鎂離子)洗1-2次。
2. 加1ml消(xiao)化液(ye)(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yang)瓶中,倒(dao)轉放(fang)于37度培養(yang)箱1-3分(fen)鐘預熱,然(ran)后(hou)又將培養(yang)瓶倒(dao)轉大約30秒后(hou),在倒(dao)置顯(xian)微鏡下觀察細胞消(xiao)化情(qing)況,若(ruo)細胞大部(bu)分(fen)變圓分(fen)散(san),輕(qing)敲幾下培養(yang)培養(yang)瓶,細胞隨即脫落下來。
3. 加入6-8ml*培養(yang)基,吸出,分到新的(de)培養(yang)瓶中(zhong)。一(yi)傳二(er)。
注意:傳(chuan)代后(hou)一半(ban)用(yong)我們(men)的培(pei)養基(ji),一半(ban)用(yong)你(ni)們(men)的,以免細胞不適應而造
成生長不好。
HaCaT
凍(dong)存液(ye):95%*培養液(ye),5%DMSO
儲存:液氮儲存
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