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HMF 人肌肉組織來源細胞
培養條件(jian):*培養基: MEM+10%胎牛血(xue)清(qing)或新生牛血(xue)清(qing)
培養(yang)條(tiao)件(jian):37.0C carbon dioxide(CO2),5%
HMF 人肌肉組織來源細胞
傳代方法:
收到(dao)細胞后,取出培養瓶在倒置顯(xian)微鏡(jing)下觀(guan)察細胞生長(chang)情況。
(一(yi))如果細胞未長滿,用(yong)75%酒精噴灑整(zheng)個瓶(ping)消(xiao)毒后放到超菌臺內,嚴(yan)格(ge)無菌操作,打開細胞培養瓶(ping),吸出培養液,僅留下10ml培養液在瓶(ping)內繼續培養。
(二)如(ru)果細胞(bao)已長(chang)滿,即可進行傳代培養。具體步驟(zou)如(ru)下(xia):
1. 棄去培養液,用(yong)PBS(不含(han)鈣,鎂(mei)離子)洗1-2次。
2. 加1ml消(xiao)化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于(yu)培養(yang)瓶(ping)中,倒(dao)轉放(fang)于(yu)37度培養(yang)箱1-3分(fen)鐘預熱,然后(hou)又將培養(yang)瓶(ping)倒(dao)轉大約30秒后(hou),在倒(dao)置顯微鏡下(xia)觀(guan)察細(xi)胞(bao)消(xiao)化情況(kuang),若細(xi)胞(bao)大部分(fen)變圓分(fen)散,輕敲幾下(xia)培養(yang)培養(yang)瓶(ping),細(xi)胞(bao)隨即脫落下(xia)來(lai)。
3. 加入6-8ml完
方法: 凍存液:95%*培養液,5%DMSO全培養基,吸出,分到新的培養瓶中。一傳二。
注意(yi):傳代后一半用我們的(de)培(pei)養基,一半用你(ni)們的(de),以免細胞不適應而造
成生長不好。
儲存:液氮儲存HMF
儲存:液氮儲存HMF
凍存
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