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HSC 人血旺細胞
培養條件:
*培養基:RPMI 1640 + 10% 胎牛血(xue)清
培養條件:37.0C carbon dioxide(CO2),5%
HSC 人血旺細胞
傳代方法:
收到細胞后,取(qu)出(chu)培(pei)養(yang)瓶在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況(kuang)。
(一(yi))如果細(xi)胞未(wei)長滿,用75%酒精噴灑整個瓶消(xiao)毒后放到超菌臺內,嚴格無菌操作,打開細(xi)胞培(pei)養瓶,吸出培(pei)養液,僅(jin)留(liu)下10ml培(pei)養液在瓶內繼(ji)續培(pei)養。
(二)如果細胞已(yi)長滿,即可進行(xing)傳(chuan)代培(pei)養。具體步驟如下:
1. 棄去培(pei)養液,用PBS(不含鈣,鎂離子)洗1-2次。
2. 加(jia)1ml消(xiao)化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于(yu)培(pei)(pei)(pei)養瓶中,倒轉(zhuan)放于(yu)37度培(pei)(pei)(pei)養箱(xiang)1-3分(fen)鐘預熱(re),然后(hou)又將培(pei)(pei)(pei)養瓶倒轉(zhuan)大(da)(da)約30秒后(hou),在(zai)倒置(zhi)顯微鏡下(xia)觀(guan)察(cha)細(xi)(xi)胞(bao)消(xiao)化情況,若細(xi)(xi)胞(bao)大(da)(da)部分(fen)變圓分(fen)散,輕敲幾(ji)下(xia)培(pei)(pei)(pei)養培(pei)(pei)(pei)養瓶,細(xi)(xi)胞(bao)隨(sui)即脫落下(xia)來。
3. 加入6-8ml*培養基(ji),吸出(chu),分(fen)到新(xin)的(de)培養瓶中。一(yi)傳二。
注(zhu)意:傳代后一半用我們的(de)培養基(ji),一半用你們的(de),以免細(xi)胞不適應而(er)造
成生長不好。
HSC
凍(dong)存方法: 凍(dong)存液:95%*培養液,5%DMSO
儲存:液氮儲存
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