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LTEP-a-2 人肺腺癌細胞
培養基和添加劑
RPMI 1640+10%胎牛(niu)血清或(huo)新生牛(niu)血清
LTEP-a-2 人肺腺癌細胞
傳代方法:
收(shou)到細胞后(hou),取出(chu)培(pei)養(yang)瓶在倒置顯(xian)微鏡下觀察細胞生長情況。
(一)如(ru)果細(xi)胞(bao)未(wei)長(chang)滿(man),用75%酒精(jing)噴灑整(zheng)個瓶消毒后放到超菌臺內,嚴(yan)格無菌操作,打開細(xi)胞(bao)培(pei)(pei)養瓶,吸(xi)出培(pei)(pei)養液(ye)(ye),僅(jin)留下10ml培(pei)(pei)養液(ye)(ye)在瓶內繼續培(pei)(pei)養。
(二)如果(guo)細胞已(yi)長(chang)滿(man),即可(ke)進行傳代培養。具體(ti)步驟如下:
1. 棄去培養液,用PBS(不(bu)含鈣,鎂離子)洗(xi)1-2次。
2. 加1ml消化(hua)液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培(pei)養瓶中,倒轉放于37度培(pei)養箱(xiang)1-3分鐘(zhong)預(yu)熱(re),然后(hou)又將培(pei)養瓶倒轉大約(yue)30秒后(hou),在倒置顯微鏡下觀察細(xi)(xi)(xi)胞消化(hua)情況,若細(xi)(xi)(xi)胞大部(bu)分變圓(yuan)分散(san),輕(qing)敲幾下培(pei)養培(pei)養瓶,細(xi)(xi)(xi)胞隨即脫落下來(lai)。
3. 加入6-8ml*培養基,吸出,分到(dao)新的(de)培養瓶中。一傳(chuan)二(er)。
注意:傳(chuan)代(dai)后(hou)一半(ban)用(yong)我們(men)的培養(yang)基,一半(ban)用(yong)你們(men)的,以(yi)免細胞不(bu)適應而造
成生長不好。
LTEP-a-2
凍存方法:
凍存(cun)液:95%*培養液,5%DMSO
儲存:液氮儲存
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