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細胞名稱
SMMC-7721 人肝癌細胞系
描述
用Northern blot方法,未能檢測到細胞(bao)中(zhong)1.3kb LFIRE-1/HFREP-1 mRNA的表達。
培養基和添加劑
RPMI 1640+10%胎牛血(xue)清或新生牛血(xue)清
SMMC-7721 人肝癌細胞系
傳代方法:
收到細(xi)胞后,取出(chu)培養瓶(ping)在倒置顯微鏡下(xia)觀察細(xi)胞生長情況。
(一)如果(guo)細胞未長(chang)滿(man),用(yong)75%酒精噴(pen)灑整(zheng)個瓶消毒后(hou)放(fang)到(dao)超菌(jun)臺內,嚴格無菌(jun)操作(zuo),打開細胞培(pei)養(yang)(yang)瓶,吸出培(pei)養(yang)(yang)液,僅(jin)留下10ml培(pei)養(yang)(yang)液在瓶內繼續培(pei)養(yang)(yang)。
(二)如果細胞已長滿(man),即可進(jin)行傳(chuan)代培養。具體步驟如下(xia):
1. 棄去培養(yang)液(ye),用(yong)PBS(不含鈣,鎂離子)洗1-2次。
2. 加1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培(pei)養(yang)瓶中,倒(dao)轉(zhuan)放(fang)于37度(du)培(pei)養(yang)箱1-3分(fen)(fen)鐘(zhong)預熱(re),然后(hou)又將(jiang)培(pei)養(yang)瓶倒(dao)轉(zhuan)大約30秒后(hou),在倒(dao)置顯(xian)微(wei)鏡下(xia)觀察細胞消化情況,若細胞大部(bu)分(fen)(fen)變(bian)圓分(fen)(fen)散,輕(qing)敲幾下(xia)培(pei)養(yang)培(pei)養(yang)瓶,細胞隨即脫落下(xia)來。
3. 加(jia)入6-8ml*培養(yang)基(ji),吸出,分到新(xin)的培養(yang)瓶中。1:3~1:6傳代(dai);2~3天(tian)1次(ci)。
。
注意:傳代后一半用我(wo)們的培養基,一半用你們的,以免細胞不適應(ying)而造
成生長不好。
凍存方法: 凍存液:基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
儲存:液氮儲存
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