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SNU-739 人肝癌細胞系
培養條件:
*培養基: EMEM,90%; 胎牛血清或新(xin)生牛血清, 10%。
培(pei)養條件(jian):37.0C carbon dioxide(CO2),5%
SNU-739 人肝癌細胞系
傳代方法:
收到細胞后,取出培養(yang)瓶在倒置(zhi)顯微鏡下觀察(cha)細胞生長情況。
(一)如果細(xi)胞(bao)未長滿,用75%酒精噴灑整個瓶(ping)消(xiao)毒(du)后放到(dao)超菌臺內,嚴格無菌操作,打開細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)瓶(ping),吸出培(pei)養(yang)液(ye),僅留下10ml培(pei)養(yang)液(ye)在瓶(ping)內繼(ji)續培(pei)養(yang)。
(二)如(ru)(ru)果細(xi)胞(bao)已長滿,即可進行傳代培(pei)養。具體步驟(zou)如(ru)(ru)下:
1. 棄去培養(yang)液,用PBS(不含鈣,鎂(mei)離子)洗1-2次(ci)。
2. 加1ml消(xiao)化液(ye)(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培(pei)養瓶(ping)中,倒轉(zhuan)放于37度培(pei)養箱1-3分鐘預(yu)熱,然(ran)后(hou)又將培(pei)養瓶(ping)倒轉(zhuan)大約30秒后(hou),在倒置顯微鏡下(xia)(xia)觀察細胞消(xiao)化情況(kuang),若細胞大部分變圓分散,輕敲幾下(xia)(xia)培(pei)養培(pei)養瓶(ping),細胞隨即(ji)脫(tuo)落下(xia)(xia)來。
3. 加入6-8ml*培養基,吸出,分到新的培養瓶中。一傳二。
注意:傳(chuan)代(dai)后一(yi)半用我們的(de)培養(yang)基,一(yi)半用你們的(de),以免細胞不適應而造
成生長不好。
凍存方法:
凍存(cun)液:95%*培養液,5%DMSO
儲存:液氮儲存
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