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HCCC-9810 人膽管細胞型肝癌細胞系
培養(yang)條件(jian): *培養(yang)基:RPMI 1640+10%胎牛血清(qing)或新生牛血清(qing)
培養條件:37.0C carbon dioxide(CO2),5%
HCCC-9810 人膽管細胞型肝癌細胞系
傳代方法:
收(shou)到細胞(bao)后,取出培養瓶在倒置(zhi)顯(xian)微(wei)鏡下觀察細胞(bao)生(sheng)長情(qing)況。
(一)如果細(xi)胞未長(chang)滿,用75%酒精噴灑整個瓶(ping)消毒后放到超菌臺內,嚴格無菌操作,打(da)開(kai)細(xi)胞培(pei)(pei)養瓶(ping),吸出培(pei)(pei)養液,僅留(liu)下(xia)10ml培(pei)(pei)養液在瓶(ping)內繼續培(pei)(pei)養。
(二)如(ru)果(guo)細胞已長滿,即可進行傳代(dai)培養。具體步(bu)驟如(ru)下:
1. 棄去(qu)培(pei)養液,用PBS(不含(han)鈣,鎂(mei)離子)洗1-2次。
2. 加1ml消化(hua)液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yang)(yang)瓶中,倒轉放于37度培養(yang)(yang)箱(xiang)1-3分(fen)(fen)鐘(zhong)預熱,然后又將培養(yang)(yang)瓶倒轉大約(yue)30秒后,在倒置顯微鏡下觀察細胞(bao)消化(hua)情況,若細胞(bao)大部分(fen)(fen)變圓分(fen)(fen)散,輕敲幾下培養(yang)(yang)培養(yang)(yang)瓶,細胞(bao)隨即(ji)脫(tuo)落下來。
3. 加入6-8ml*培養基,吸出,分到(dao)新的培養瓶(ping)中。一(yi)傳二。
注(zhu)意:傳代(dai)后一半(ban)(ban)用(yong)(yong)我們(men)的培養基,一半(ban)(ban)用(yong)(yong)你們(men)的,以免細胞不適(shi)應而造(zao)
成生長不好。
凍(dong)(dong)存方法: 凍(dong)(dong)存液:95%*培養液,5%DMSO
儲存:液氮儲存
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