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LTEP-P 人小細胞肺癌細胞
培養條件:
*培養基: DMEM,90%;胎牛血清10%。
培養(yang)條件:37.0C carbon dioxide(CO2),5%
LTEP-P 人小細胞肺癌細胞
LTEP-P
傳代方法:
收到細胞后(hou),取(qu)出培養(yang)瓶在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況。
(一)如果(guo)細(xi)(xi)胞未長滿,用(yong)75%酒精噴灑整個瓶(ping)消毒后放到超菌(jun)臺內,嚴(yan)格無菌(jun)操(cao)作(zuo),打開細(xi)(xi)胞培(pei)(pei)(pei)養(yang)瓶(ping),吸出培(pei)(pei)(pei)養(yang)液,僅留下(xia)10ml培(pei)(pei)(pei)養(yang)液在瓶(ping)內繼續培(pei)(pei)(pei)養(yang)。
(二)如果細胞已長滿(man),即(ji)可進行傳代培養。具體步驟如下(xia):
1. 棄去(qu)培(pei)養液(ye),用(yong)PBS(不(bu)含鈣,鎂(mei)離子)洗1-2次。
2. 加1ml消化(hua)液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)瓶中,倒(dao)轉放于37度培(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)箱1-3分(fen)鐘(zhong)預熱,然后(hou)又將培(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)瓶倒(dao)轉大約30秒后(hou),在倒(dao)置(zhi)顯微鏡下(xia)觀(guan)察細胞消化(hua)情(qing)況,若細胞大部分(fen)變圓分(fen)散(san),輕敲幾下(xia)培(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)培(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)瓶,細胞隨即脫(tuo)落下(xia)來。
3. 加入6-8ml*培養(yang)基,吸出,分到(dao)新的培養(yang)瓶中(zhong)。一(yi)傳二(er)。
注意:傳代后一(yi)(yi)半用我(wo)們的培養基,一(yi)(yi)半用你們的,以免細(xi)胞不適應而造(zao)
成生長不好。
LTEP-P
凍存方法:
凍存液:95%*培養(yang)液,5%DMSO
儲存:液氮儲存
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