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ACCC 11063 黃色短桿菌
注意事項
1、 微生物菌種應保藏于低溫、清(qing)潔和干(gan)燥的地方,室(shi)溫放置時間過長會導(dao)致菌種衰(shuai)退;
2、 菌(jun)種操作應在無(wu)菌(jun)條(tiao)件下進(jin)行,防(fang)止雜菌(jun)污染;
3、 斜面(mian)菌種保藏時(shi)間通常(chang)為(wei)3-6個月(yue),應根據菌種狀況及時(shi)轉接;凍干(gan)菌種保藏時(shi)間通常(chang)為(wei)2-15年;
菌種保藏方法
1. 傳代培養保(bao)藏法
又有斜面培養、穿刺培養、皰肉培養基(ji)培養等(后者作保藏厭氧細菌用),培養后于4-6℃冰箱內保存。
2. 液體(ti)石蠟覆蓋(gai)保藏法(fa)
是傳代培養(yang)的變相方法(fa),能夠適當延長保(bao)藏時間,它是在斜面培養(yang)物和穿刺培養(yang)物上面覆蓋滅菌的液(ye)體石蠟,一(yi)方面可防止因培養(yang)基水分蒸發而引(yin)起(qi)菌種(zhong)死亡,另一(yi)方面可阻止氧(yang)氣(qi)進入,以減弱代謝作用。
3. 載體保藏法
是將微(wei)生(sheng)物吸附(fu)在(zai)適當的載體(ti),如土(tu)壤、沙子、硅膠、濾(lv)(lv)紙上,而后進行干燥的保藏法(fa),例(li)如沙土(tu)保藏法(fa)和濾(lv)(lv)紙保藏法(fa)應用相當廣泛。
4. 寄主保藏法
ACCC 11063 黃色短桿菌
用于目前尚不能在人工培養基上(shang)生(sheng)(sheng)長的(de)微生(sheng)(sheng)物,如(ru)病毒、立克次氏體(ti)、螺旋體(ti)等(deng),它們必須在生(sheng)(sheng)活的(de)動物、昆(kun)蟲、雞胚內(nei)感染并傳(chuan)代,此法(fa)(fa)相當于一般微生(sheng)(sheng)物的(de)傳(chuan)代培養保(bao)藏法(fa)(fa)。病毒等(deng)微生(sheng)(sheng)物亦可用其他方(fang)法(fa)(fa)如(ru)液氮保(bao)藏法(fa)(fa)與(yu)冷(leng)凍干燥保(bao)藏法(fa)(fa)進行(xing)保(bao)藏。
5. 冷凍保藏法
可分低溫冰箱(-20-30℃,-50-80℃)、干冰酒精快速(su)凍結(約-70℃)和液氮(dan)(-196℃)等保藏法。
6. 冷(leng)凍干燥(zao)保藏法
先(xian)使微生物在極低溫度(-70℃左右)下快(kuai)速冷凍,然后在減壓下利(li)用升(sheng)華現象除去水分(fen)(真空干燥)。
有些(xie)方(fang)法(fa)(fa)如(ru)濾紙保(bao)藏(zang)法(fa)(fa)、液氮保(bao)藏(zang)法(fa)(fa)和冷凍干燥保(bao)藏(zang)法(fa)(fa)等(deng)均需使用(yong)保(bao)護(hu)(hu)劑(ji)來制備細(xi)(xi)胞(bao)懸液,以防(fang)止因冷凍或水分不斷(duan)升華對細(xi)(xi)胞(bao)的損(sun)害。保(bao)護(hu)(hu)性(xing)溶(rong)質可(ke)通(tong)過氫和離子鍵對水和細(xi)(xi)胞(bao)所產生的親和力來穩定細(xi)(xi)胞(bao)成分的構型。保(bao)護(hu)(hu)劑(ji)有牛乳、血清、糖類(lei)、甘油(you)、二甲亞砜等(deng)。
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