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CMCC(B) 98003 黑曲霉
菌(jun)種保藏方(fang)法
1. 傳代(dai)培養(yang)保藏法(fa)
又(you)有斜面培(pei)養、穿刺培(pei)養、皰肉培(pei)養基(ji)培(pei)養等(后者作保藏厭氧(yang)細菌(jun)用),培(pei)養后于(yu)4-6℃冰箱內(nei)保存。
2. 液(ye)體(ti)石蠟覆蓋保(bao)藏法
是傳代(dai)培(pei)養的變相(xiang)方法(fa),能夠適當延長保藏時間,它(ta)是在斜面(mian)培(pei)養物和穿(chuan)刺培(pei)養物上面(mian)覆(fu)蓋滅菌的液體石蠟,一方面(mian)可(ke)防止因(yin)培(pei)養基水分(fen)蒸發(fa)而引(yin)起菌種死(si)亡,另一方面(mian)可(ke)阻止氧氣進入,以減弱代(dai)謝(xie)作用。
3. 載體保藏法
是(shi)將微(wei)生(sheng)物吸附在(zai)適當(dang)的(de)載體,如(ru)土(tu)壤、沙(sha)子、硅膠(jiao)、濾(lv)紙上,而(er)后(hou)進行(xing)干燥(zao)的(de)保(bao)藏法,例如(ru)沙(sha)土(tu)保(bao)藏法和濾(lv)紙保(bao)藏法應用相當(dang)廣泛。
4. 寄主保藏法
用于目(mu)前尚不(bu)能在人工培(pei)養基上(shang)生(sheng)長的微生(sheng)物,如病(bing)毒(du)、立克次氏體、螺旋體等,它們必須在生(sheng)活的動物、昆蟲、雞胚內感染(ran)并(bing)傳代(dai)(dai),此法(fa)(fa)相當于一般微生(sheng)物的傳代(dai)(dai)培(pei)養保藏法(fa)(fa)。病(bing)毒(du)等微生(sheng)物亦可用其他方法(fa)(fa)如液氮保藏法(fa)(fa)與(yu)冷凍干(gan)燥保藏法(fa)(fa)進行保藏。
5. 冷凍保藏法
CMCC(B) 98003 黑曲霉
可分低溫(wen)冰(bing)箱(-20-30℃,-50-80℃)、干冰(bing)酒(jiu)精快速凍結(jie)(約-70℃)和(he)液氮(-196℃)等保藏(zang)法。
6. 冷凍干燥保(bao)藏法
先使微生物在(zai)極(ji)低溫度(-70℃左(zuo)右)下快速冷凍(dong),然(ran)后(hou)在(zai)減壓下利用升華(hua)現象除(chu)去水分(真空干燥)。
有些方(fang)法(fa)如濾紙(zhi)保藏法(fa)、液氮(dan)保藏法(fa)和冷凍干(gan)燥保藏法(fa)等均需使用保護劑來制備細(xi)胞懸液,以(yi)防止(zhi)因冷凍或水(shui)分不斷升華對細(xi)胞的(de)損害。保護性溶質可(ke)通(tong)過氫和離(li)子鍵對水(shui)和細(xi)胞所產生的(de)親和力來穩定(ding)細(xi)胞成分的(de)構型。保護劑有牛乳、血清、糖(tang)類、甘(gan)油、二甲亞砜(feng)等。
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