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CMCC 54002 單核增生李斯特菌菌種保(bao)藏方(fang)法
1. 傳代培養(yang)保(bao)藏法(fa)
又有斜(xie)面(mian)培(pei)(pei)養(yang)、穿刺培(pei)(pei)養(yang)、皰肉培(pei)(pei)養(yang)基培(pei)(pei)養(yang)等(deng)(后者作(zuo)保藏厭(yan)氧細菌用),培(pei)(pei)養(yang)后于4-6℃冰箱內(nei)保存。
2. 液體石(shi)蠟覆蓋保藏法
是(shi)傳(chuan)代培(pei)養的變相方法,能夠適當延長保(bao)藏時間,它是(shi)在斜(xie)面培(pei)養物(wu)和(he)穿刺培(pei)養物(wu)上(shang)面覆蓋滅菌(jun)的液體石蠟,一方面可(ke)防止因培(pei)養基水分(fen)蒸發而引起菌(jun)種(zhong)死(si)亡,另一方面可(ke)阻(zu)止氧氣進入,以(yi)減弱代謝作(zuo)用。
3. 載體保藏法
是將微(wei)生物吸(xi)附(fu)在適(shi)當的載體,如土壤、沙(sha)子、硅膠、濾(lv)紙(zhi)上,而后進行干燥的保藏(zang)法,例如沙(sha)土保藏(zang)法和濾(lv)紙(zhi)保藏(zang)法應用(yong)相(xiang)當廣泛(fan)。
CMCC 54002 單核增生李斯特菌
4. 寄主保藏法(fa)
用(yong)(yong)于目(mu)前尚不能在人工培(pei)養基上生(sheng)(sheng)長的(de)微生(sheng)(sheng)物(wu),如病毒、立(li)克(ke)次氏(shi)體、螺旋體等,它(ta)們必須(xu)在生(sheng)(sheng)活的(de)動物(wu)、昆蟲、雞胚(pei)內感染并(bing)傳代(dai),此法相當于一(yi)般微生(sheng)(sheng)物(wu)的(de)傳代(dai)培(pei)養保藏法。病毒等微生(sheng)(sheng)物(wu)亦可(ke)用(yong)(yong)其他方法如液(ye)氮保藏法與冷(leng)凍(dong)干燥(zao)保藏法進行保藏。
5. 冷凍保藏法
可分低溫冰箱(-20-30℃,-50-80℃)、干冰酒精快(kuai)速(su)凍結(約-70℃)和(he)液(ye)氮(-196℃)等保藏法(fa)。
6. 冷凍干燥保藏(zang)法
先(xian)使(shi)微生物在極低溫度(-70℃左(zuo)右)下(xia)快(kuai)速冷(leng)凍,然后在減壓下(xia)利(li)用(yong)升華現象除去水分(真空干(gan)燥)。
有(you)(you)些方法如濾紙保藏(zang)法、液(ye)氮保藏(zang)法和(he)冷凍干燥保藏(zang)法等均需使用(yong)保護(hu)(hu)劑(ji)來制備(bei)細(xi)胞(bao)懸液(ye),以防(fang)止因冷凍或水分不斷升華(hua)對(dui)細(xi)胞(bao)的(de)損(sun)害。保護(hu)(hu)性溶質(zhi)可通過氫和(he)離(li)子鍵對(dui)水和(he)細(xi)胞(bao)所產(chan)生的(de)親和(he)力來穩定細(xi)胞(bao)成分的(de)構型。保護(hu)(hu)劑(ji)有(you)(you)牛(niu)乳、血清、糖類、甘油、二甲亞砜等。
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