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CMCC(B) 52204小腸結腸炎耶爾森氏菌
菌種保藏方法
1. 傳代培養保藏法
又(you)有(you)斜(xie)面培(pei)養(yang)、穿刺培(pei)養(yang)、皰肉培(pei)養(yang)基(ji)培(pei)養(yang)等(后者作保藏厭氧細菌用),培(pei)養(yang)后于(yu)4-6℃冰(bing)箱內(nei)保存。
2. 液體(ti)石蠟覆(fu)蓋(gai)保藏法
是(shi)傳代培養(yang)(yang)(yang)的變相方法,能夠適當延長(chang)保藏時間(jian),它(ta)是(shi)在斜面(mian)(mian)培養(yang)(yang)(yang)物和(he)穿刺培養(yang)(yang)(yang)物上面(mian)(mian)覆蓋滅菌(jun)的液體石蠟,一(yi)方面(mian)(mian)可防止因培養(yang)(yang)(yang)基水分蒸發(fa)而引起(qi)菌(jun)種死(si)亡,另一(yi)方面(mian)(mian)可阻(zu)止氧氣進(jin)入,以減弱代謝作用。
3. 載體保藏法
是將微生(sheng)物吸(xi)附(fu)在適當的(de)載(zai)體,如土壤(rang)、沙(sha)子(zi)、硅(gui)膠、濾紙(zhi)(zhi)上,而后進(jin)行干燥的(de)保藏(zang)(zang)法,例如沙(sha)土保藏(zang)(zang)法和濾紙(zhi)(zhi)保藏(zang)(zang)法應用相當廣泛。
4. 寄主保藏法
用于目前尚不能在人工培(pei)養(yang)基(ji)上生長的(de)(de)微(wei)生物(wu),如病毒、立克次氏體、螺旋體等,它(ta)們必須在生活的(de)(de)動物(wu)、昆蟲、雞胚內感染并(bing)傳(chuan)代(dai),此法(fa)相當于一般(ban)微(wei)生物(wu)的(de)(de)傳(chuan)代(dai)培(pei)養(yang)保(bao)(bao)藏法(fa)。病毒等微(wei)生物(wu)亦(yi)可用其他(ta)方(fang)法(fa)如液氮(dan)保(bao)(bao)藏法(fa)與冷凍干燥保(bao)(bao)藏法(fa)進行保(bao)(bao)藏。
5. 冷凍保藏法
可分低溫冰箱(-20-30℃,-50-80℃)、干冰酒精快速凍結(約-70℃)和液氮(dan)(-196℃)等保藏(zang)法。
6. 冷凍干燥保藏(zang)法
先使微生物在(zai)極低(di)溫度(-70℃左右)下快速冷(leng)凍,然后在(zai)減壓(ya)下利用升華現象除(chu)去水分(真(zhen)空(kong)干燥)。
CMCC(B) 52204小腸結腸炎耶爾森氏菌
有些方法(fa)如(ru)濾紙保(bao)藏(zang)法(fa)、液(ye)氮保(bao)藏(zang)法(fa)和冷凍(dong)干燥(zao)保(bao)藏(zang)法(fa)等均(jun)需使用保(bao)護(hu)(hu)(hu)劑(ji)來制(zhi)備(bei)細(xi)胞(bao)懸液(ye),以防止因冷凍(dong)或水(shui)分不斷升華對(dui)細(xi)胞(bao)的損害。保(bao)護(hu)(hu)(hu)性溶質(zhi)可通過氫和離(li)子鍵對(dui)水(shui)和細(xi)胞(bao)所產生的親和力(li)來穩定細(xi)胞(bao)成分的構型。保(bao)護(hu)(hu)(hu)劑(ji)有牛乳、血清、糖類、甘油、二甲亞(ya)砜等。
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