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CICC 2014 米曲霉
菌種保藏方法
1. 傳(chuan)代培養保藏法
又有斜面培養
2. 液體石蠟覆蓋(gai)保藏、穿刺培養(yang)(yang)、皰肉培養(yang)(yang)基培養(yang)(yang)等(后者作保藏(zang)厭(yan)氧細(xi)菌用(yong)),培養(yang)(yang)后于4-6℃冰箱(xiang)內保存。法(fa)
是傳(chuan)代(dai)培(pei)(pei)養的(de)變相(xiang)方法(fa),能夠適(shi)當延(yan)長保藏時間(jian),它(ta)是在斜(xie)面(mian)培(pei)(pei)養物和穿(chuan)刺(ci)培(pei)(pei)養物上面(mian)覆蓋滅菌的(de)液體(ti)石蠟,一方面(mian)可(ke)防(fang)止(zhi)因(yin)培(pei)(pei)養基水(shui)分(fen)蒸發(fa)而引起菌種(zhong)死(si)亡(wang),另一方面(mian)可(ke)阻止(zhi)氧氣進(jin)入,以減弱代(dai)謝作用。
3. 載體保藏法
是(shi)將微生物(wu)吸(xi)附在(zai)適當的(de)載體,如(ru)土壤、沙子(zi)、硅(gui)膠(jiao)、濾紙上,而后進行干燥的(de)保藏法,例如(ru)沙土保藏法和濾紙保藏法應用(yong)相當廣泛。
4. 寄主保藏法
用于目前尚不能在人工培(pei)(pei)養(yang)基上生(sheng)(sheng)長的微生(sheng)(sheng)物(wu),如(ru)病毒、立克次(ci)氏體(ti)、螺旋體(ti)等,它(ta)們必須在生(sheng)(sheng)活的動(dong)物(wu)、昆(kun)蟲、雞胚內感染并(bing)傳代,此法相當于一(yi)般微生(sheng)(sheng)物(wu)的傳代培(pei)(pei)養(yang)保藏(zang)(zang)法。病毒等微生(sheng)(sheng)物(wu)亦(yi)可(ke)用其他方法如(ru)液氮保藏(zang)(zang)法與冷凍干(gan)燥保藏(zang)(zang)法進(jin)行保藏(zang)(zang)。
5. 冷凍保藏法
可分(fen)低(di)溫冰(bing)箱(xiang)(-20-30℃,-50-80℃)、干(gan)冰(bing)酒精快速凍結(約-70℃)和液氮(dan)(-196℃)等保藏法。
6. 冷凍干燥(zao)保藏(zang)法
先使微生物在(zai)極低(di)溫度(-70℃左(zuo)右(you))下快(kuai)速冷(leng)凍,然后(hou)在(zai)減(jian)壓下利用升華現象除去水分(真空干燥)。
CICC 2014 米曲霉
有些方法如濾紙保(bao)(bao)藏(zang)(zang)法、液氮保(bao)(bao)藏(zang)(zang)法和冷(leng)凍干(gan)燥保(bao)(bao)藏(zang)(zang)法等均需使用保(bao)(bao)護(hu)劑來制備細(xi)胞懸(xuan)液,以防止因冷(leng)凍或(huo)水分不斷升(sheng)華對(dui)(dui)細(xi)胞的(de)(de)損(sun)害。保(bao)(bao)護(hu)性溶質(zhi)可通過氫和離子鍵對(dui)(dui)水和細(xi)胞所產(chan)生的(de)(de)親和力來穩定細(xi)胞成分的(de)(de)構型(xing)。保(bao)(bao)護(hu)劑有牛乳、血清、糖類、甘油、二甲(jia)亞砜等。
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