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CMCC 49005
菌種保藏方法
1. 傳代培養保藏法
又(you)有斜面培(pei)養(yang)、穿刺培(pei)養(yang)、皰肉培(pei)養(yang)基培(pei)養(yang)等(后者作保藏厭氧細菌用(yong)),培(pei)養(yang)后于(yu)4-6℃冰(bing)箱內(nei)保存。
2. 液體石蠟(la)覆蓋(gai)保(bao)藏法
是(shi)傳代培(pei)(pei)養的變相方法,能(neng)夠(gou)適當延長保(bao)藏時間,它是(shi)在斜(xie)面(mian)(mian)(mian)培(pei)(pei)養物和穿刺培(pei)(pei)養物上面(mian)(mian)(mian)覆蓋滅菌的液(ye)體(ti)石蠟,一方面(mian)(mian)(mian)可防止(zhi)因培(pei)(pei)養基水分蒸發(fa)而引(yin)起菌種死亡,另一方面(mian)(mian)(mian)可阻(zu)止(zhi)氧氣進入,以減(jian)弱代謝作用。
3. 載體保藏法
是將(jiang)微生(sheng)物吸附在適當的載體,如(ru)土壤、沙(sha)子、硅膠、濾紙(zhi)上,而后進行(xing)干燥(zao)的保藏法,例如(ru)沙(sha)土保藏法和濾紙(zhi)保藏法應用相當廣泛。
4. 寄主保藏法
用(yong)于(yu)目(mu)前尚不能在人工培養(yang)基上生(sheng)長的微(wei)生(sheng)物(wu)(wu),如病毒、立克次(ci)氏體、螺旋體等(deng),它們必須(xu)在生(sheng)活的動物(wu)(wu)、昆蟲、雞(ji)胚內(nei)感染并傳(chuan)代,此法(fa)相當于(yu)一般微(wei)生(sheng)物(wu)(wu)的傳(chuan)代培養(yang)保(bao)(bao)藏(zang)法(fa)。病毒等(deng)微(wei)生(sheng)物(wu)(wu)亦(yi)可(ke)用(yong)其(qi)他方(fang)法(fa)如液(ye)氮(dan)保(bao)(bao)藏(zang)法(fa)與冷凍干燥(zao)保(bao)(bao)藏(zang)法(fa)進行保(bao)(bao)藏(zang)。
5. 冷凍保藏法
CMCC 49005
可(ke)分低溫冰箱(-20-30℃,-50-80℃)、干冰酒(jiu)精快速凍(dong)結(jie)(約-70℃)和(he)液(ye)氮(-196℃)等保(bao)藏法。
6. 冷凍(dong)干燥保(bao)藏法(fa)
先使微生(sheng)物在極低溫度(-70℃左右)下快(kuai)速冷凍,然后在減壓下利用(yong)升華現象除去水分(真(zhen)空干燥)。
有些方(fang)法(fa)(fa)如(ru)濾紙保(bao)(bao)藏(zang)法(fa)(fa)、液氮保(bao)(bao)藏(zang)法(fa)(fa)和冷(leng)凍(dong)干(gan)燥保(bao)(bao)藏(zang)法(fa)(fa)等(deng)均(jun)需(xu)使用保(bao)(bao)護(hu)劑來制備細胞懸液,以防(fang)止因冷(leng)凍(dong)或水(shui)(shui)分不(bu)斷升(sheng)華對細胞的(de)(de)損害。保(bao)(bao)護(hu)性(xing)溶質可(ke)通過氫和離子鍵對水(shui)(shui)和細胞所(suo)產生的(de)(de)親和力(li)來穩定細胞成分的(de)(de)構型。保(bao)(bao)護(hu)劑有牛乳、血清、糖類(lei)、甘油、二甲亞砜等(deng)。
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