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CICC 10019 謝氏丙酸桿菌 注意事項:
1、 微生物菌種(zhong)應保(bao)藏(zang)于低溫、清潔和(he)干燥的地方,室溫放置時間過長會導致菌種(zhong)衰退;
2、 菌(jun)種操作應在無(wu)菌(jun)條件下進行,防(fang)止雜(za)菌(jun)污染(ran);
3、 斜面菌(jun)(jun)種保藏時間通常(chang)為3-6個月(yue),應根據(ju)菌(jun)(jun)種狀況及時轉接;凍干菌(jun)(jun)種保藏時間通常(chang)為2-15年;
CICC 10019 謝氏丙酸桿菌 菌種(zhong)保藏方(fang)法
1. 傳(chuan)代培(pei)養(yang)保(bao)藏法
又有斜面培養(yang)、穿(chuan)刺(ci)培養(yang)、皰(pao)肉培養(yang)基(ji)培養(yang)等(deng)(后(hou)者作保(bao)藏厭氧(yang)細菌用),培養(yang)后(hou)于4-6℃冰箱內保(bao)存。
2. 液體(ti)石蠟覆蓋保藏法
是傳代培(pei)養(yang)(yang)的(de)變(bian)相方(fang)(fang)法,能夠適當延長(chang)保藏時(shi)間,它是在斜面培(pei)養(yang)(yang)物(wu)和穿刺培(pei)養(yang)(yang)物(wu)上面覆蓋滅菌的(de)液(ye)體石蠟,一方(fang)(fang)面可防止(zhi)因培(pei)養(yang)(yang)基水分蒸發(fa)而引起菌種死亡(wang),另(ling)一方(fang)(fang)面可阻止(zhi)氧(yang)氣進入,以減弱代謝作用。
3. 載體保藏法
是將微生物吸(xi)附在(zai)適當(dang)的(de)載體,如土壤、沙子、硅(gui)膠(jiao)、濾紙(zhi)上,而后進(jin)行干燥的(de)保藏法(fa),例如沙土保藏法(fa)和濾紙(zhi)保藏法(fa)應用相當(dang)廣泛。
4. 寄主保藏法
用于目前尚不能在人工(gong)培(pei)養(yang)基上生(sheng)長(chang)的(de)微(wei)(wei)生(sheng)物(wu),如病毒、立克次(ci)氏體、螺(luo)旋體等(deng)(deng),它們必(bi)須(xu)在生(sheng)活(huo)的(de)動物(wu)、昆蟲、雞胚內(nei)感染(ran)并傳代,此法(fa)相(xiang)當于一般微(wei)(wei)生(sheng)物(wu)的(de)傳代培(pei)養(yang)保(bao)藏法(fa)。病毒等(deng)(deng)微(wei)(wei)生(sheng)物(wu)亦(yi)可用其他(ta)方法(fa)如液氮(dan)保(bao)藏法(fa)與(yu)冷(leng)凍干燥保(bao)藏法(fa)進行保(bao)藏。
5. 冷凍保藏法
可分低溫冰箱(xiang)(-20-30℃,-50-80℃)、干冰酒(jiu)精快速凍結(約(yue)-70℃)和液氮(-196℃)等保藏法。
6. 冷凍干燥保藏法
先使微生物(wu)在(zai)極(ji)低溫度(-70℃左右)下快速冷凍,然后在(zai)減壓下利用升華現象(xiang)除去水分(真空干燥)。
有(you)些(xie)方法如濾紙(zhi)保(bao)藏(zang)法、液氮保(bao)藏(zang)法和冷凍干燥(zao)保(bao)藏(zang)法等均(jun)需使用(yong)保(bao)護劑(ji)(ji)來制(zhi)備細(xi)胞(bao)懸液,以(yi)防止因冷凍或水分不(bu)斷升華(hua)對細(xi)胞(bao)的損害。保(bao)護性溶(rong)質可(ke)通過(guo)氫和離子鍵(jian)對水和細(xi)胞(bao)所產(chan)生的親和力來穩定細(xi)胞(bao)成分的構型(xing)。保(bao)護劑(ji)(ji)有(you)牛乳、血清、糖(tang)類、甘(gan)油、二甲亞砜等。
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