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CMCC 53504 假結核耶爾森氏菌 注意事項
1、 微生物菌(jun)種(zhong)(zhong)應(ying)保藏(zang)于低溫、清(qing)潔和干(gan)燥的地方,室溫放(fang)置時間過長會導致菌(jun)種(zhong)(zhong)衰退;
2、 菌種操作(zuo)應在無菌條件(jian)下進行,防(fang)止雜菌污染;
3、 斜面(mian)菌種保(bao)藏(zang)時(shi)間(jian)通常為3-6個(ge)月(yue),應(ying)根據(ju)菌種狀況及時(shi)轉接(jie);凍干菌種保(bao)藏(zang)時(shi)間(jian)通常為2-15年(nian);
CM
CC 53504 假結核耶爾森氏菌 菌種保藏方法
1. 傳代(dai)培養保藏(zang)法
又(you)有斜面培(pei)養、穿刺培(pei)養、皰肉培(pei)
刺養(yang)基培養(yang)等(后者作(zuo)保(bao)藏厭氧細菌用),培養(yang)后于4-6℃冰箱(xiang)內保(bao)存。
2. 液體(ti)石蠟覆蓋保藏(zang)法(fa)
是(shi)傳(chuan)代(dai)(dai)培養(yang)(yang)的(de)變相方(fang)法(fa),能夠適(shi)當延(yan)長(chang)保藏時間,它是(shi)在(zai)斜面(mian)培養(yang)(yang)物和穿培養(yang)(yang)物上面(mian)覆蓋(gai)滅菌的(de)液體石蠟(la),一(yi)方(fang)面(mian)可防(fang)止因(yin)培養(yang)(yang)基水分蒸(zheng)發而(er)引起菌種死亡(wang),另一(yi)方(fang)面(mian)可阻止氧氣進(jin)入(ru),以減(jian)弱代(dai)(dai)謝(xie)作用。
3. 載體保藏法
是將(jiang)微生(sheng)物吸附在適當的載(zai)體,如土(tu)壤(rang)、沙子、硅膠、濾(lv)紙上,而后進行干燥的保(bao)藏法,例如沙土(tu)保(bao)藏法和濾(lv)紙保(bao)藏法應用相當廣泛。
4. 寄主保藏法
用(yong)于目前尚不能在人工(gong)培(pei)(pei)養(yang)基上生(sheng)長的(de)微生(sheng)物(wu),如病毒、立克(ke)次氏體、螺旋體等(deng),它(ta)們必須在生(sheng)活的(de)動(dong)物(wu)、昆蟲、雞(ji)胚(pei)內(nei)感染并(bing)傳(chuan)代(dai),此法(fa)(fa)相當于一般微生(sheng)物(wu)的(de)傳(chuan)代(dai)培(pei)(pei)養(yang)保(bao)(bao)藏(zang)法(fa)(fa)。病毒等(deng)微生(sheng)物(wu)亦(yi)可用(yong)其(qi)他方法(fa)(fa)如液氮保(bao)(bao)藏(zang)法(fa)(fa)與(yu)冷凍干(gan)燥保(bao)(bao)藏(zang)法(fa)(fa)進(jin)行保(bao)(bao)藏(zang)。
5. 冷凍保藏法
可(ke)分低溫冰(bing)箱(-20-30℃,-50-80℃)、干冰(bing)酒精快速凍結(約-70℃)和液氮(-196℃)等保藏法(fa)。
6. 冷(leng)凍干燥保藏法
先使微生物在(zai)極低溫度(-70℃左右)下快速冷(leng)凍,然后在(zai)減壓下利用升華(hua)現象(xiang)除去水分(fen)(真空干燥(zao))。
CMCC 53504 假結核耶爾森氏菌
有些方法如濾紙保(bao)藏(zang)法、液氮保(bao)藏(zang)法和冷(leng)凍(dong)干燥保(bao)藏(zang)法等均需使用保(bao)護(hu)劑(ji)來制(zhi)備細胞(bao)懸液,以防止因冷(leng)凍(dong)或(huo)水分(fen)不斷(duan)升(sheng)華對細胞(bao)的(de)損害。保(bao)護(hu)性溶質可通過氫和離子鍵對水和細胞(bao)所產生的(de)親(qin)和力來穩定細胞(bao)成分(fen)的(de)構型。保(bao)護(hu)劑(ji)有牛(niu)乳、血清、糖(tang)類、甘油、二甲亞砜(feng)等。
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