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MouseM 小鼠肌肉細胞的詳細介紹
MouseM 小鼠肌肉細胞
培養條件:
*培養基(ji):DMEM高糖培養基(ji)90%;胎牛血清(qing)10%。
培養條件:37.0C carbon dioxide(CO2),5%
傳代方法:
收到細胞后,取出培養瓶在倒(dao)置顯微鏡下觀察細胞生長(chang)情況。
(一)如果細胞(bao)未長滿(man),用75%酒精(jing)噴灑整個瓶(ping)消(xiao)毒后放到超菌臺內(nei),嚴格無(wu)菌操作,打開細胞(bao)培養瓶(ping),吸(xi)出(chu)培養液,僅留下(xia)10ml培養液在瓶(ping)內(nei)繼續培養。
(二)如(ru)(ru)果細(xi)胞已長滿(man),即(ji)可進(jin)行傳代培養。具體步驟如(ru)(ru)下:
1. 棄去培養液,用(yong)PBS(不含鈣,鎂離(li)子)洗1-2次。
2. 加1ml消化液(ye)(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培(pei)養瓶中,倒(dao)轉放于37度培(pei)養箱1-3分鐘預熱,然后(hou)又將培(pei)養瓶倒(dao)轉大約30秒后(hou),在倒(dao)置顯(xian)微鏡下(xia)觀察細(xi)胞消化情況,若(ruo)細(xi)胞大部分變圓(yuan)分散,輕敲幾(ji)下(xia)培(pei)養培(pei)養瓶,細(xi)胞隨即(ji)脫(tuo)落下(xia)來。
3. 加入6-8ml*培養基,吸出,分到(dao)新的(de)培養瓶中(zhong)。1:3~1:6傳代;2~3天1次。
。
注意:傳代(dai)后一(yi)半用我們的(de)培(pei)養基,一(yi)半用你們的(de),以(yi)免細胞不適應而造(zao)
成生長不好。
凍(dong)存方法: 凍(dong)存液:基(ji)礎(chu)培養基(ji)+5%DMSO+20%FBS
儲存:液氮儲存
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