簡(jian)要描述:G422 小鼠神經(jing)膠質瘤細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao),ATCC 細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)|細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)系|細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)株(zhu)|細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao),細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)庫管理規范(fan),提(ti)供的細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)株(zhu)背景(jing)清楚,提(ti)供參考文獻和培養(yang)條件
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G422 小鼠神經膠質瘤細胞
培養基和添加劑
RPMI 1640+10%胎(tai)牛(niu)血(xue)清(qing)或新生牛(niu)血(xue)清(qing)
傳代方法:
收(shou)到細(xi)胞后,取出驟培養(yang)瓶在倒置顯微鏡下(xia)觀察細(xi)胞生長情況。
(一)如(ru)果(guo)細胞未長滿,用75%酒精噴灑整(zheng)個瓶消毒后放(fang)到超菌臺內(nei), 嚴格無菌操作(zuo),打開細胞培(pei)養(yang)瓶,吸出培(pei)養(yang)液(ye)(ye),僅(jin)留下10ml培(pei)養(yang)液(ye)(ye)在瓶內(nei)繼續(xu)培(pei)養(yang)。
(二)如果(guo)細(xi)胞已長(chang)滿(man),即可進行傳代(dai)培養。具(ju)體(ti)步(bu)如下:
1. 棄去培養(yang)液,用PBS(不含鈣,鎂離(li)子)洗1-2次。
2. 加1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于(yu)培(pei)(pei)養(yang)瓶中(zhong), 倒轉放于(yu)37度培(pei)(pei)養(yang)箱1-3分(fen)鐘預熱,然后(hou)又將(jiang)培(pei)(pei)養(yang)瓶倒轉大(da)約(yue)30秒后(hou), 在倒置顯(xian)微鏡(jing)下觀察細(xi)胞(bao)消化情況,若細(xi)胞(bao)大(da)部(bu)分(fen)變(bian)圓分(fen)散,輕敲幾下培(pei)(pei)養(yang)培(pei)(pei)養(yang)瓶, 細(xi)胞(bao)隨即脫落下來。
3. 加(jia)入6-8ml*培(pei)養基,吸出,分到新的(de)培(pei)養瓶中。1:3~1:6傳代;2~3天1次(ci)。
。
注意(yi):傳代(dai)后一(yi)半用我們(men)(men)的培養基,一(yi)半用你們(men)(men)的,以(yi)免細(xi)胞不(bu)適應而造
成生長不好。
凍存方法: 凍存液:基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
儲存:液氮儲存
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