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9L 小鼠膠質瘤細胞株
培養條件: | *培養基:PMI1640+10%胎牛(niu)血清 培(pei)養條件:37.0C carbon dioxide(CO2),5% 9L 小鼠膠質瘤細胞株 | |
傳代方法: | 收到細胞后,取出培養(yang)瓶在倒(dao)置顯微鏡(jing)下觀察細胞生長情(qing)況。 (一)如(ru)果細胞未(wei)長滿,用75%酒精噴灑整(zheng)個瓶消毒(du)后(hou)放到超菌(jun)臺內,嚴(yan)格(ge)無菌(jun)操作(zuo),打開細胞培(pei)養瓶,吸出(chu)培(pei)養液,僅(jin)留下10ml培(pei)養液在(zai)瓶內繼續培(pei)養。 (二)如果細胞已長滿,即可進行傳代(dai)培養。具體步驟如下: 1. 棄去(qu)培養液,用(yong)PBS(不含鈣,鎂離(li)子(zi))洗1-2次(ci)。 2. 加(jia)1ml消化(hua)液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培(pei)養(yang)瓶(ping)中,倒轉放于37度培(pei)養(yang)箱1-3分(fen)(fen)鐘預(yu)熱(re),然后又將培(pei)養(yang)瓶(ping)倒轉大(da)約30秒(miao)后,在倒置顯(xian)微鏡(jing)下(xia)觀察細(xi)(xi)胞消化(hua)情況,若細(xi)(xi)胞大(da)部分(fen)(fen)變圓分(fen)(fen)散,輕敲幾(ji)下(xia)培(pei)養(yang)培(pei)養(yang)瓶(ping),細(xi)(xi)胞隨即脫落下(xia)來。 3. 加(jia)入6-8ml*培養基,吸出,分到新的培養瓶中(zhong)。一傳二。 注(zhu)意(yi):傳代后一半(ban)用我們的(de)培養基(ji),一半(ban)用你們的(de),以(yi)免細胞不適應而造 成生長不好。 | |
凍存方法: | 凍存液(ye):95%*培養液(ye),5%DMSO 儲存:液氮儲存 |
凍存液(ye):95%*培(pei)養(yang)液(ye),5%DMSO
儲存:液氮儲存
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