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簡(jian)要描述:Lewis 小鼠肺癌細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao) ,ATCC 細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)|細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)系|細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)株|腫瘤(liu)細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)|細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)|貼壁(bi)細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)|懸浮細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)|,細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)庫管理規(gui)范,提供的細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)株背景(jing)清楚,提供參考文獻和培養條件(jian),
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Lewis 小鼠肺癌細胞,ATCC 細胞|細胞系|細胞株|腫瘤細胞|細胞|貼壁細胞|懸浮細胞|,細胞庫管理規范,提供的細胞株背景清楚,提供參考文獻i優培養條件
Lewis 小鼠肺癌細胞培養(yang)條(tiao)件:*培養(yang)基: DMEM高糖90%+10%胎(tai)牛血清(qing)
培(pei)養條件:37.0C carbon dioxide(CO2),5%
傳代方法:
收到細胞后,取出培養瓶在倒置(zhi)顯微(wei)鏡(jing)下觀察細胞生長情(qing)況。
(一)如果(guo)細胞未(wei)長滿,用75%酒精(jing)噴灑整(zheng)個瓶消(xiao)毒后放到超菌臺內,嚴格(ge)無菌操(cao)作,打開(kai)細胞培(pei)(pei)養瓶,吸出(chu)培(pei)(pei)養液,僅留下(xia)10ml培(pei)(pei)養液在瓶內繼續培(pei)(pei)養。
(二(er))如(ru)果細(xi)胞已長(chang)滿(man),即可(ke)進行傳(chuan)代培養。具體步驟如(ru)下(xia):
1. 棄去培養液,用PBS(不含鈣,鎂離子(zi))洗1-2次(ci)。
2. 加1ml消化液(ye)(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培(pei)(pei)養瓶(ping)中,倒(dao)(dao)轉(zhuan)放于37度培(pei)(pei)養箱1-3分(fen)鐘預熱,然后又(you)將培(pei)(pei)養瓶(ping)倒(dao)(dao)轉(zhuan)大約30秒后,在倒(dao)(dao)置(zhi)顯微鏡下觀察細(xi)胞(bao)消化情況(kuang),若細(xi)胞(bao)大部分(fen)變圓分(fen)散(san),輕敲幾(ji)下培(pei)(pei)養培(pei)(pei)養瓶(ping),細(xi)胞(bao)隨即脫落下來。
3. 加入6-8ml*培養基,吸出,分到新的(de)培養瓶中(zhong)。一(yi)傳(chuan)二。
注意:傳代后一(yi)半(ban)用我們的培(pei)養基,一(yi)半(ban)用你們的,以(yi)免細胞不適應(ying)而造
成生長不好。
凍存方法: 凍存液(ye):95%*培(pei)養液(ye),5%DMSO
儲存:液氮儲存
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