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簡(jian)要描述:MM45T.Li 鼠肝癌細(xi)胞(bao)(bao)(bao) , ATCC 細(xi)胞(bao)(bao)(bao)|細(xi)胞(bao)(bao)(bao)系|細(xi)胞(bao)(bao)(bao)株(zhu)|腫瘤細(xi)胞(bao)(bao)(bao)|細(xi)胞(bao)(bao)(bao)|貼壁細(xi)胞(bao)(bao)(bao)|懸浮細(xi)胞(bao)(bao)(bao)|,細(xi)胞(bao)(bao)(bao)庫管理規范,提(ti)供的(de)細(xi)胞(bao)(bao)(bao)株(zhu)背景清楚,提(ti)供參(can)考(kao)文獻和培養(yang)條(tiao)件(jian),
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MM45T.Li 鼠肝癌細胞 , ATCC 細胞|細胞系|細胞株|腫瘤細胞|細胞|貼壁細胞|懸浮細胞|,細胞庫管理規范,提供的細胞株背景清楚,提供參考文獻和i優培養條件
MM45T.Li 鼠肝癌細胞
培養條件:
*培養基:DMEM高糖培養基90%;胎牛(niu)血清10%。
培養(yang)條件:37.0C carbon dioxide(CO2),5%
傳代方法:
收到細(xi)胞(bao)后,取出培養瓶在倒置顯微(wei)鏡(jing)下觀察細(xi)胞(bao)生長情況。
(一)如果細(xi)胞未(wei)長滿,用75%酒(jiu)精(jing)噴(pen)灑整個瓶消毒(du)后(hou)放(fang)到超菌臺內,嚴格無菌操作,打開細(xi)胞培(pei)養(yang)(yang)瓶,吸出培(pei)養(yang)(yang)液(ye),僅留下10ml培(pei)養(yang)(yang)液(ye)在(zai)瓶內繼續培(pei)養(yang)(yang)。
(二)如(ru)果細胞(bao)已長(chang)滿,即可進行傳代培養。具體(ti)步驟如(ru)下:
1. 棄去培(pei)養液,用PBS(不含(han)鈣,鎂離(li)子)洗1-2次。
2. 加1ml消化(hua)液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培(pei)(pei)(pei)養瓶中,倒(dao)轉放于37度培(pei)(pei)(pei)養箱(xiang)1-3分鐘(zhong)預熱,然后(hou)又將(jiang)培(pei)(pei)(pei)養瓶倒(dao)轉大約30秒后(hou),在倒(dao)置(zhi)顯微鏡下(xia)觀(guan)察細胞(bao)消化(hua)情(qing)況,若細胞(bao)大部分變圓分散,輕敲幾下(xia)培(pei)(pei)(pei)養培(pei)(pei)(pei)養瓶,細胞(bao)隨即(ji)脫落下(xia)來。
3. 加(jia)入6-8ml*培養基,吸出(chu),分到(dao)新的培養瓶中。1:3~1:6傳代;2~3天(tian)1次(ci)。
。
注意(yi):傳(chuan)代后一半(ban)用我們(men)的(de)(de)培養(yang)基,一半(ban)用你們(men)的(de)(de),以免細胞不適應(ying)而(er)造
成生長不好。
凍(dong)存方(fang)法: 凍(dong)存液(ye):基礎培(pei)養基+5%DMSO+20%FBS
儲存:液氮儲存
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